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l蓝色窗帘

新虫 (初入文坛)

[求助] 关于量子点与YoYo-1的荧光能量转移问题已有1人参与

目的:目前想用QDs来跟踪DNA在细胞中的位置。
先用YoYo-1来染色DNA,然后与材料络合加入细胞,在不同的吞噬时间来观察其位置。但是存在的问题就是YoYo-1/DNA 与量子点没有办法同时拍到,用488激发根本就看不到YoYo-1/DNA的光,QDs可以观察到。随后又排除了YoYo-1与DNA的问题。后来我在培养盒中加入乙醇之后,能看到YoYo-1的光,但是QDs 的光就会削弱很多。不知道问题出在哪里。求助各位大神帮忙。

QDs:水溶性量子点,用聚合物修饰。λem=570nm
YOYO-1/DNA:λex=489nm,λem=509nm.
不知道是不是能量转移的问题,关于这个领域不了解,想请各位看一下,看原因在哪儿。谢谢了!
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l蓝色窗帘

新虫 (初入文坛)

自己顶一下,求大神回复
2楼2015-07-27 13:59:21
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markar

版主 (知名作家)

光之电首席技术官

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【答案】应助回帖

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感谢参与,应助指数 +1
l蓝色窗帘: 金币+50 2015-07-30 08:50:44
是否能量转移了应该比较容易判断吧。你取同样的溶液,不添加DNA,但是里面YoYo-1和QDs的浓度设为一样,然后查看是否能分别看到两者的荧光。如果不能就表明两者发生能量转移了。
如果上述方法不行的话,就得分别比较YoYo-1和QDs的激发光谱了,先选择可以激发出YoYo-1荧光但是QDs无法激发出荧光的激发波长,看看是否有YoYo-1的荧光,同理看看QDs是否有荧光。
另外从你的文中依稀能看出,YoYo-1在乙醇中有比较强的荧光,而QDs又是水溶性量子点,是否是溶液的原因不同导致的呢。建议做相同浓度的水溶液YoYo-1看看是否有荧光,另外查看下相同乙醇溶液的QDs是否有荧光,这些条件下如果都看了的话,才容易比较是否是能量转移导致的。
另外还需要比较的是YoYo-1的荧光发射光谱是否和QDs的激发光谱有重合,理论上来说,两者重合越多越容易发生能量转移。

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宠辱不惊,闲看庭前花开花落;去留无意,漫随天外云卷云舒!
3楼2015-07-27 21:08:05
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l蓝色窗帘

新虫 (初入文坛)

送红花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by markar at 2015-07-27 21:08:05
是否能量转移了应该比较容易判断吧。你取同样的溶液,不添加DNA,但是里面YoYo-1和QDs的浓度设为一样,然后查看是否能分别看到两者的荧光。如果不能就表明两者发生能量转移了。
如果上述方法不行的话,就得分别比较 ...

回复有点晚了,谢谢你
4楼2015-07-30 08:50:27
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