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关于引物纯化与长度问题 已有2人参与
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大家好。我正在做SSR，引物纯化方法的选择，与对应的DNA片段长度相关，我用其中一对引物，F:ATGTTCGGTAGTCATCCCCT R:GCTCAGATAGCCACTCCCC 在NCBI primer blast输入后，得到这一结果：请问对应的DNA片段长度是正向引物与反向引物长度之和吗？另外，显示的扩增片段大小准确吗？我看文献，位点都不超过400bp呀！请大神指点迷津。非常感谢。  1.png  1.png |
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976592787
木虫 (正式写手)
国家自然科学基金委员会委员长
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【答案】应助回帖
★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
洛可可薇薇(西门吹雪170代发): 金币+3, 鼓励回帖交流 2015-07-31 22:07:34
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洛可可薇薇(西门吹雪170代发): 金币+3, 鼓励回帖交流 2015-07-31 22:07:34
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请问对应的DNA片段长度是正向引物与反向引物长度之和吗？ 答：DNA片段长度是正反向引物延伸后扩增的pcr产物长度（一般几百到几千bp），引物长度是引物长度（通常15-30bp），如题：740=4337-3598;740=4496-3757. 显示的扩增片段大小准确吗？ 答：显示的扩增片段是根据你设计的引物得出的，准不准确，好不好用是引物设计的问题，文献可能用的是其它位点的引物。 Conclusion：希望楼主明白pcr的基本原理之所在，引物设计的基本原则，万望采纳鄙人之拙见，谢谢！ |
2楼2015-07-23 19:17:29
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本帖内容被屏蔽 |
3楼2015-07-30 13:57:23
