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洛可可薇薇

铁虫 (小有名气)

[求助] 关于引物纯化与长度问题 已有2人参与

大家好。我正在做SSR,引物纯化方法的选择,与对应的DNA片段长度相关,我用其中一对引物,F:ATGTTCGGTAGTCATCCCCT R:GCTCAGATAGCCACTCCCC
在NCBI primer blast输入后,得到这一结果:请问对应的DNA片段长度是正向引物与反向引物长度之和吗?另外,显示的扩增片段大小准确吗?我看文献,位点都不超过400bp呀!请大神指点迷津。非常感谢。

关于引物纯化与长度问题
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关于引物纯化与长度问题-1
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976592787

木虫 (正式写手)

国家自然科学基金委员会委员长

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
洛可可薇薇(西门吹雪170代发): 金币+3, 鼓励回帖交流 2015-07-31 22:07:34
请问对应的DNA片段长度是正向引物与反向引物长度之和吗?
答:DNA片段长度是正反向引物延伸后扩增的pcr产物长度(一般几百到几千bp),引物长度是引物长度(通常15-30bp),如题:740=4337-3598;740=4496-3757.
显示的扩增片段大小准确吗?
答:显示的扩增片段是根据你设计的引物得出的,准不准确,好不好用是引物设计的问题,文献可能用的是其它位点的引物。
Conclusion:希望楼主明白pcr的基本原理之所在,引物设计的基本原则,万望采纳鄙人之拙见,谢谢!
耻与众草之为伍,何亭亭而独芳!何不为人之所赏兮,深山穷谷委严霜。
2楼2015-07-23 19:17:29
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liugs

禁虫 (正式写手)

本帖内容被屏蔽

3楼2015-07-30 13:57:23
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