如何在载体上加纯化标签 - 分子生物 - 分子生理 - 第2页小木虫论坛-学术科研互动平台

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恶魔的左眼

木虫 (正式写手)

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专业: 蛋白质组学

★
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引用回帖:

10楼: Originally posted by 99蜗牛99 at 2015-07-21 15:48:26
6-his标签是由6个组氨酸组成吗

...

His标签是蛋白质重组技术中经常用到的一种标签，其序列为六个组氨酸HHHHHH，其特点是分子量小，基本不改变蛋白质的生物结构，不改变蛋白质的溶解性，更重要的是它使蛋白质的纯化变得极为方便，根据组氨酸上的咪唑环可以与二价金属离子结合的原理，人们可以利金属离子亲和层析技术纯化带有His标签的蛋白，即将含有目的蛋白的裂解液通过固定的二价金属离子（通常是二价Ni离子）填料，带有6*his标签的蛋白质即与填料结合，其它蛋白不与填料结合，最后再用高浓度的咪唑即可将目的蛋白洗脱下来。
His标签单抗可以用来鉴定His标签的蛋白质的表达情况（如目的蛋白的相对表达量、分子量）、在细胞中的定位以及其它特性。