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pet-28a表达蛋白分子量变小？？？
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| 我在用pet-28a表达一蛋白时，后面检测它的分子量变小了（应该40KD，现在只有25KD左右），请问哪位同仁知道这是什么原因？？？ |
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4楼2008-08-07 11:49:11
humants
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- 专业: 蛋白质组学
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reasonspare(金币+3,VIP+0):谢谢分享，欢迎常来
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我感觉这不该载体是，很有可能： 1.你的基因在pcr是碱基错配产生了，意外的终止子，不知道你测序了没？ 2.可能是你的基因中有连续的3-5个的大肠杆菌稀有密码子，导致表达中止，你先去下面的网站做一下密码子偏好分析：http://www.bio-soft.net/sms/。 若是1的原因只能重做PCR，换成高保真的taq。 若是2的原因可以尝试 a.降低发酵温度让他表达的慢一点，也许会表达全。 b.换一下菌株换成Rosetta系列的，可以补充稀有密码子。 希望能给你帮助。 |
2楼2008-08-07 10:01:21
3楼2008-08-07 10:48:19