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酵母基因组抽提的问题 已有1人参与
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方法： 1、培养菌体，离心，用液氮研磨，研磨3次以上。 2、取研磨菌体至1.5ml离心管中，加入500ul TE溶液，加入30ul 10%SDS，加入5ul 10mg/ml蛋白酶K，55℃ 1.5h。 3、加入535ul 酚/氯仿/异戊醇，轻轻混匀，静置3min，12000rpm 5min，分有三层，中间有一层薄薄的蛋白质层，取上层水相至新离心管。 4、加入等体积氯仿/异戊醇，轻轻混匀，12000rpm 5min，中间蛋白质层很少，取上层水相至新离心管。 5、加入1/10 NaAc，加入2.5倍体积无水乙醇，室温静置20min，发现没有絮状物。-20℃静置 20min，还是没有絮状物。 到底是哪里出了问题啊！！！！！！！！！！ |
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