24小时热门版块排行榜    

查看: 1091  |  回复: 5

紫漠清扬

新虫 (初入文坛)

[求助] 双酶切问题 已有2人参与

各位大神,用thermo的快切酶BamH1 和 takala 的慢切酶Not1 对重组载体做双酶切处理,另外还要用一快切酶(与BamH1条件相同)做载体粉碎,请问buffer如何选,时间如何确定?在线等~
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

忘忧草_

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
thermo的快切酶绝大部分的buffer不是通用吗
不将就
2楼2015-07-16 10:49:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hottest-jia

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
快切酶的buffer理论上是相同的啊,不能确定的话你可以做两个坐下对照呗,希望可以帮到你
3楼2015-07-16 16:39:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

紫漠清扬

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 忘忧草_ at 2015-07-16 10:49:14
thermo的快切酶绝大部分的buffer不是通用吗

谢谢,快切酶的buffer是通用的。可是我做双酶切用的一个是快切酶,一个是慢切酶,来自不同公司,没有通用buffer。
4楼2015-07-17 10:03:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

紫漠清扬

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by hottest-jia at 2015-07-16 16:39:55
快切酶的buffer理论上是相同的啊,不能确定的话你可以做两个坐下对照呗,希望可以帮到你

是,我做载体粉碎用的是快切酶。双酶切一个用快切,一个慢切
5楼2015-07-17 10:05:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

紫漠清扬

新虫 (初入文坛)

问题解决~我用快切酶先切,切完后灭活酶,然后用慢切酶切--加慢切酶buffer。切完跑胶,目的条带亮亮哒~~

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
6楼2015-07-18 16:59:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 紫漠清扬 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 不应该看fileCode +5 且听虎啸 2026-08-12 6/300 2026-08-12 16:26 by Tide man
[基金申请] 好奇怪的filecode +5 布布和一二 2026-08-08 6/300 2026-08-12 16:11 by 云上清扬
[基金申请] 长年满屏的广告,版主太不责任了。基金也等的急 +4 gltch 2026-08-12 4/200 2026-08-12 16:08 by eulota
[基金申请] 应该是93bebmhtak前后十一个字符比较关键 +22 Lanmanbaby 2026-08-09 35/1750 2026-08-12 14:38 by sdfapple719
[论文投稿] 职称评审,求友友推荐见刊最快的期刊 +4 工厂打螺丝 2026-08-08 4/200 2026-08-12 09:18 by hansi2025
[基金申请] 小木虫上这么多卖论文的,真有人买论文么?感觉没必要啊 +8 Tide man 2026-08-10 9/450 2026-08-11 20:39 by beefly
[基金申请] 有时候,自然基金真的不能太认真 (我的申报经验) +3 majunge000 2026-08-11 4/200 2026-08-11 20:13 by lch2012
[基金申请] 帮忙看看fileCode +7 wwncly 2026-08-10 13/650 2026-08-11 19:36 by 冰心玉壶晴
[基金申请] 什么时候出结果,有咨询渠道??? +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
[基金申请] 分享一下我之前已中青C的计划书的filecode +3 布布和一二 2026-08-11 4/200 2026-08-11 15:20 by aasahr
[基金申请] 我的国基提前知道中了,可是同事的操作让我实在接受不了,怎么会有这样的人 +8 家与远方 2026-08-10 13/650 2026-08-11 09:49 by 家与远方
[基金申请] 确定了,国自然21号放榜 +6 布布和一二 2026-08-10 7/350 2026-08-10 19:15 by 2000zf36392
[基金申请] 2026国自然放榜时间 +9 布布和一二 2026-08-08 9/450 2026-08-10 11:22 by xxxx2020
[基金申请] 这样的filecode谁见过 +11 布布和一二 2026-08-08 22/1100 2026-08-10 11:10 by wmfsnow
[基金申请] filecode与中标关系的预测 +5 布布和一二 2026-08-07 5/250 2026-08-09 16:15 by 袁向阳007
[基金申请] 关于filecode,很负责任的告诉大家 +6 爱看书的可乐 2026-08-08 7/350 2026-08-08 22:13 by a_niu
[基金申请] 国基金的申报应该改成非等额制,评价高的钱多评价低的钱少,但是增加资助率 +7 a089 2026-08-07 7/350 2026-08-08 18:05 by gltch
[基金申请] 关于filecode +4 布布和一二 2026-08-07 7/350 2026-08-07 22:55 by zhanghaozhu
[基金申请] 固定端突然变了,今天 +6 archvillain 2026-08-06 10/500 2026-08-07 16:03 by 医学老男孩
[基金申请] filecode +8 布布和一二 2026-08-06 11/550 2026-08-06 20:41 by tangpu318
信息提示
请填处理意见