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紫漠清扬

新虫 (初入文坛)

[求助] 双酶切问题 已有2人参与

各位大神,用thermo的快切酶BamH1 和 takala 的慢切酶Not1 对重组载体做双酶切处理,另外还要用一快切酶(与BamH1条件相同)做载体粉碎,请问buffer如何选,时间如何确定?在线等~
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忘忧草_

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
thermo的快切酶绝大部分的buffer不是通用吗
不将就
2楼2015-07-16 10:49:14
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hottest-jia

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
快切酶的buffer理论上是相同的啊,不能确定的话你可以做两个坐下对照呗,希望可以帮到你
3楼2015-07-16 16:39:55
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紫漠清扬

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 忘忧草_ at 2015-07-16 10:49:14
thermo的快切酶绝大部分的buffer不是通用吗

谢谢,快切酶的buffer是通用的。可是我做双酶切用的一个是快切酶,一个是慢切酶,来自不同公司,没有通用buffer。
4楼2015-07-17 10:03:25
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紫漠清扬

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by hottest-jia at 2015-07-16 16:39:55
快切酶的buffer理论上是相同的啊,不能确定的话你可以做两个坐下对照呗,希望可以帮到你

是,我做载体粉碎用的是快切酶。双酶切一个用快切,一个慢切
5楼2015-07-17 10:05:01
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紫漠清扬

新虫 (初入文坛)

问题解决~我用快切酶先切,切完后灭活酶,然后用慢切酶切--加慢切酶buffer。切完跑胶,目的条带亮亮哒~~

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
6楼2015-07-18 16:59:46
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