24小时热门版块排行榜    

查看: 1088  |  回复: 5

紫漠清扬

新虫 (初入文坛)

[求助] 双酶切问题 已有2人参与

各位大神,用thermo的快切酶BamH1 和 takala 的慢切酶Not1 对重组载体做双酶切处理,另外还要用一快切酶(与BamH1条件相同)做载体粉碎,请问buffer如何选,时间如何确定?在线等~
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

忘忧草_

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
thermo的快切酶绝大部分的buffer不是通用吗
不将就
2楼2015-07-16 10:49:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hottest-jia

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
快切酶的buffer理论上是相同的啊,不能确定的话你可以做两个坐下对照呗,希望可以帮到你
3楼2015-07-16 16:39:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

紫漠清扬

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 忘忧草_ at 2015-07-16 10:49:14
thermo的快切酶绝大部分的buffer不是通用吗

谢谢,快切酶的buffer是通用的。可是我做双酶切用的一个是快切酶,一个是慢切酶,来自不同公司,没有通用buffer。
4楼2015-07-17 10:03:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

紫漠清扬

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by hottest-jia at 2015-07-16 16:39:55
快切酶的buffer理论上是相同的啊,不能确定的话你可以做两个坐下对照呗,希望可以帮到你

是,我做载体粉碎用的是快切酶。双酶切一个用快切,一个慢切
5楼2015-07-17 10:05:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

紫漠清扬

新虫 (初入文坛)

问题解决~我用快切酶先切,切完后灭活酶,然后用慢切酶切--加慢切酶buffer。切完跑胶,目的条带亮亮哒~~

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
6楼2015-07-18 16:59:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 紫漠清扬 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 静等基金结果 +5 gjjjzhong 2026-08-10 16/800 2026-08-10 17:19 by Tide man
[基金申请] filecode +6 documentary 2026-08-10 6/300 2026-08-10 17:09 by wdc28
[基金申请] 我的国基提前知道中了,可是同事的操作让我实在接受不了,怎么会有这样的人 +8 家与远方 2026-08-10 11/550 2026-08-10 17:09 by 六两废铜
[基金申请] 关于Filecode分析方法 +3 majunge000 2026-08-10 3/150 2026-08-10 15:46 by lch2012
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
[基金申请] FileCode能看出啥? +4 要乐观耀哥 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:02 by 天神眷顾
[基金申请] 奇怪,两个人的filecode固定段从头到尾一模一样 +4 布布和一二 2026-08-10 4/200 2026-08-10 14:50 by 医学老男孩
[基金申请] 8月时间戳变的,举个手。玩一下,释放压力 +11 archvillain 2026-08-04 13/650 2026-08-10 14:41 by seekfind
[基金申请] 据悉今年马上要出结果了 +7 瞬息宇宙 2026-08-10 8/400 2026-08-10 12:42 by Vivilian
[基金申请] 关于代码变化问题,想知道的进来 +16 且听虎啸 2026-08-07 23/1150 2026-08-10 12:35 by majunge000
[基金申请] 2026国自然放榜时间 +9 布布和一二 2026-08-08 9/450 2026-08-10 11:22 by xxxx2020
[基金申请] 关于filecode,很负责任的告诉大家 +6 爱看书的可乐 2026-08-08 7/350 2026-08-08 22:13 by a_niu
[基金申请] 关于豆爷回答的JTJC与%2F数量 +5 yang182083 2026-08-06 7/350 2026-08-08 18:29 by zhanghaozhu
[基金申请] 基金中了 +14 laoda193707 2026-08-06 14/700 2026-08-08 00:23 by 实验小白ha
[基金申请] 关于filecode +4 布布和一二 2026-08-07 7/350 2026-08-07 22:55 by zhanghaozhu
[基金申请] 化学口download_prp&fileCode的固定段好像这几天一直没变,有变的大神么? +3 Tide man 2026-08-07 4/200 2026-08-07 22:39 by Tide man
[基金申请] 固定端突然变了,今天 +6 archvillain 2026-08-06 10/500 2026-08-07 16:03 by 医学老男孩
[基金申请] 影响面上的因素 +8 布布和一二 2026-08-05 11/550 2026-08-06 10:41 by 宝贝虫子
[基金申请] 有没有H口的?有收到消息的吗? +3 超级海虾 2026-08-04 3/150 2026-08-04 17:26 by 学教育滴
[基金申请] 纯娱乐,不喜欢勿喷 +7 Tide man 2026-08-04 10/500 2026-08-04 15:10 by loufangrui
信息提示
请填处理意见