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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 原核表达中PMAL载体酶切后回收率低怎么破？
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hottest-jia

新虫 (初入文坛)

[求助] 原核表达中PMAL载体酶切后回收率低怎么破？ 已有3人参与

我做的是原核表达实验，PMAL载体酶切后的长度在5100bp左右，但是每次用试剂盒回收时回收率很低，我应该怎么办？
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1楼 2015-07-16 09:35:02
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Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你的载体和菌株能给我一份吗？我可以帮你搞定这个问题

[ 发自小木虫客户端 ]
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2楼2015-07-16 10:56:47
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hottest-jia

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by Neo2000 at 2015-07-16 10:56:47
你的载体和菌株能给我一份吗？我可以帮你搞定这个问题

怎么给你啊？
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3楼2015-07-16 16:23:16
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wangpeng227

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
严格按照说明书的比例加缓冲液，可以多过几遍柱子。
酶切载体可多做一些，比如做200uL体系，这样回收的量可能会大一些。
实在不行可以换一家试剂盒试试。
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4楼2015-07-16 16:33:43
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thaw

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
不过柱，直接乙醇沉淀，损失25%左右
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5楼2015-07-17 09:05:02
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