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hottest-jia

新虫 (初入文坛)

[求助] 原核表达中PMAL载体酶切后回收率低怎么破? 已有3人参与

我做的是原核表达实验,PMAL载体酶切后的长度在5100bp左右,但是每次用试剂盒回收时回收率很低,我应该怎么办?
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Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你的载体和菌株能给我一份吗?我可以帮你搞定这个问题

[ 发自小木虫客户端 ]
2楼2015-07-16 10:56:47
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hottest-jia

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by Neo2000 at 2015-07-16 10:56:47
你的载体和菌株能给我一份吗?我可以帮你搞定这个问题

怎么给你啊?
3楼2015-07-16 16:23:16
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wangpeng227

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
严格按照说明书的比例加缓冲液,可以多过几遍柱子。
酶切载体可多做一些,比如做200uL体系,这样回收的量可能会大一些。
实在不行可以换一家试剂盒试试。
4楼2015-07-16 16:33:43
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thaw

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
不过柱,直接乙醇沉淀,损失25%左右
5楼2015-07-17 09:05:02
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