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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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daidai0124

木虫 (正式写手)

[交流] 酶透析的问题

最近需要分离纯化酶,但是硫酸铵沉淀之后做透析就遇到了问题,大家做透析的时候透析袋是怎么扎的啊?有专门的夹子夹透析袋还是用细绳绑住啊,还有就是透析的时候一直用缓冲液吗?用缓冲液的话,蒸馏水的消耗量打的惊人啊,而且一般要透析好长时间!好像听人说可以先用自来水透析,再用缓冲液.不知道哪位大虾有这方面的经验,给介绍下啊!小弟在此谢过了!
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mwhtyg

金虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by hqhe at 2008-8-6 20:39:
不要用水,用缓冲液,不然酶易失活
在一定的盐浓度下蛋白才稳定

请问用什么样的缓冲液才能把硫酸铵透析出去而又不影响酶的活性呢?
11楼2008-09-30 13:22:32
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pph0259

木虫 (正式写手)


daidai0124(金币+1,VIP+0):谢谢了
有夹子就用夹子,不过夹子是有点小贵的!没有就只有扎绳子了,记得用棉绳!
不能用自来水透析!
不知道你的量,但是一般用不了太多的缓冲液,100-200ml一次,一次透析2-3h;换个2-3次就可以了!记着一定是少量多次的换,而不是用一大瓶缓冲,不进行更换。
2楼2008-08-05 22:57:58
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pph0259

木虫 (正式写手)


daidai0124(金币+1,VIP+0):以后做实验会注意这点
补充一句,最好在冰上透析,蛋白不容易失活
3楼2008-08-05 22:58:54
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daidai0124

木虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by pph0259 at 2008-8-5 22:57:
有夹子就用夹子,不过夹子是有点小贵的!没有就只有扎绳子了,记得用棉绳!
不能用自来水透析!
不知道你的量,但是一般用不了太多的缓冲液,100-200ml一次,一次透析2-3h;换个2-3次就可以了!记着一定是少量多 ...

夹子怎么买啊,我想卖试剂的公司买,,让他们给送点透析袋的夹子,他们也不知道是什么样的夹子,普通的夹子应该不行吧!这种夹子应该怎么样称呼呢?
我做的时候好想透析两三天都没透析完,我还是用500ml,基本上一天换两次水,不知道你是怎么检测硫酸铵是否透析完全,我是用氯化钡,一直到第三天都还能检测到沉淀!
4楼2008-08-06 08:24:10
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