应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 酶透析的问题
121/2返回列表12下一页
查看: 567  |  回复: 11
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前主题已经存档。

daidai0124

木虫 (正式写手)

[交流] 酶透析的问题

最近需要分离纯化酶,但是硫酸铵沉淀之后做透析就遇到了问题,大家做透析的时候透析袋是怎么扎的啊?有专门的夹子夹透析袋还是用细绳绑住啊,还有就是透析的时候一直用缓冲液吗?用缓冲液的话,蒸馏水的消耗量打的惊人啊,而且一般要透析好长时间!好像听人说可以先用自来水透析,再用缓冲液.不知道哪位大虾有这方面的经验,给介绍下啊!小弟在此谢过了!
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2008-08-05 22:10:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

pph0259

木虫 (正式写手)
★
daidai0124(金币+1,VIP+0):谢谢了
有夹子就用夹子，不过夹子是有点小贵的！没有就只有扎绳子了，记得用棉绳！
不能用自来水透析！
不知道你的量，但是一般用不了太多的缓冲液，100-200ml一次，一次透析2-3h；换个2-3次就可以了！记着一定是少量多次的换，而不是用一大瓶缓冲，不进行更换。
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2008-08-05 22:57:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

pph0259

木虫 (正式写手)
★
daidai0124(金币+1,VIP+0):以后做实验会注意这点
补充一句，最好在冰上透析，蛋白不容易失活
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2008-08-05 22:58:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

daidai0124

木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by pph0259 at 2008-8-5 22:57:
有夹子就用夹子，不过夹子是有点小贵的！没有就只有扎绳子了，记得用棉绳！
不能用自来水透析！
不知道你的量，但是一般用不了太多的缓冲液，100-200ml一次，一次透析2-3h；换个2-3次就可以了！记着一定是少量多 ...

夹子怎么买啊,我想卖试剂的公司买,,让他们给送点透析袋的夹子,他们也不知道是什么样的夹子,普通的夹子应该不行吧!这种夹子应该怎么样称呼呢?
我做的时候好想透析两三天都没透析完,我还是用500ml,基本上一天换两次水,不知道你是怎么检测硫酸铵是否透析完全,我是用氯化钡,一直到第三天都还能检测到沉淀!
赞一下 回复此楼
4楼2008-08-06 08:24:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

raindrop8316

金虫 (正式写手)
★ ★ ★
reasonspare(金币+2,VIP+0):thx
daidai0124(金币+1,VIP+0):谢谢了
就叫“透析袋夹子”。

我们透析的时候是在冰箱里透析，4个小时换一次缓冲液。

[ Last edited by raindrop8316 on 2008-8-6 at 09:12 ]
赞一下(10人) 回复此楼
书到用时方恨少 钱到月底不够花
5楼2008-08-06 09:10:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sunyi394

银虫 (小有名气)
★ ★ ★
reasonspare(金币+2,VIP+0):thx
daidai0124(金币+1,VIP+0):谢谢
冰上透析，直接放冰箱4度不就 行了
赞一下(11人) 回复此楼
6楼2008-08-06 09:21:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hqhe

木虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★ ★
reasonspare(金币+4,VIP+0):积极交流奖
daidai0124(金币+1,VIP+0):谢谢
透析可以在层析柜里面进行，保持4度左右就行了
如果盐浓度过高最好梯度透析，以免过猛了引起沉淀
用多少透析液是需要根据你要透析的体积而定的，比如你透析的东西有5 ml以上，则需要至少800 ml以上的透析液才有较好的效果，这个在分子克隆等书上都能够查到的
赞一下(10人) 回复此楼
7楼2008-08-06 10:21:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

daidai0124

木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by hqhe at 2008-8-6 10:21:
透析可以在层析柜里面进行，保持4度左右就行了
如果盐浓度过高最好梯度透析，以免过猛了引起沉淀
用多少透析液是需要根据你要透析的体积而定的，比如你透析的东西有5 ml以上，则需要至少800 ml以上的透析液才有 ...

不知大家做透析时使用蒸馏水还是缓冲液,如果是缓冲液的话,岂不要配好多啊,我要透析的东西可能有十几毫升,岂不要配十几升缓冲液?
赞一下 回复此楼
8楼2008-08-06 15:15:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

raindrop8316

金虫 (正式写手)
缓冲液透析。
没听说过用蒸馏水透析的，呵呵
赞一下 回复此楼
书到用时方恨少 钱到月底不够花
9楼2008-08-06 15:21:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hqhe

木虫 (正式写手)
不要用水，用缓冲液，不然酶易失活
在一定的盐浓度下蛋白才稳定
赞一下 回复此楼
10楼2008-08-06 20:39:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 daidai0124 的主题更新
121/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考博] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-05 4/200 2026-11-05 23:39 by qL1cU46YIdK0
[基金申请] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 9/450 2026-11-05 23:28 by qL1cU46YIdK0
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 6/300 2026-11-05 23:19 by qL1cU46YIdK0
[考研] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 9/450 2026-11-05 23:17 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 10/500 2026-11-05 23:17 by qL1cU46YIdK0
[考研] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 12/600 2026-11-05 22:57 by qL1cU46YIdK0
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +5 kvewwGtKktqB 2026-11-04 13/650 2026-11-05 22:55 by qL1cU46YIdK0
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +6 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 15/750 2026-11-05 22:44 by qL1cU46YIdK0
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +5 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 13/650 2026-11-05 22:44 by qL1cU46YIdK0
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +6 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 11/550 2026-11-05 22:35 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 10/500 2026-11-05 22:33 by qL1cU46YIdK0
[考博] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +7 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 17/850 2026-11-05 22:24 by qL1cU46YIdK0
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 PYZmcHr5kSaq 2026-11-05 5/250 2026-11-05 21:27 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 7/350 2026-11-05 20:43 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 hNpp4Y2CGvSC 2026-11-04 11/550 2026-11-05 20:21 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 8/400 2026-11-05 20:21 by qL1cU46YIdK0
[考研] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +5 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 11/550 2026-11-05 20:10 by qL1cU46YIdK0
[考研] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 13/650 2026-11-05 17:15 by My20PsvIExYO
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 12/600 2026-11-05 11:10 by PYZmcHr5kSaq
[基金申请] 各位基础老师们，看完中央《从严治党》的决定后，对学术界更加有信心了吧 +5 iaeyuan 2026-11-01 5/250 2026-11-04 14:43 by jinchengzi
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭