| 查看: 3115 | 回复: 5 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
[求助]
dss诱导c57小鼠结肠炎模型提结肠RNA做real time pcr，为什么连内参都测不出ct值？ 已有1人参与
|
||
|
我最近在做2%dss诱导的结肠炎小鼠模型，首先强调一下，我实验中用的所有方法，引物，试剂盒不是来自相关文献中就是实验室已经用了很长时间的，我个人也做过非常多的提组织RNA做real time pcr的经验。可这次实在是没办法了，只好来问问大家。 我是看了多篇博士论文和SCI文献，按它们的方法取的结肠组织，然后加trizol研磨提取RNA，DNA酶1处理后逆转录成cDNA，做real time pcr。为了结果更可靠，我特意同时处理了一只没有给药，普通饲养的小鼠。 结果非常奇怪。我用的所有引物都来自SCI文献，这些文献都是做的dss肠炎模型，小鼠品系跟我也一样。可我的小鼠就是跑不出来结果，ct值测不出来，关键连内参都跑不出来，我的cDNA上样量每个孔从1ug到5ug以上都试过了，全部都测不出ct值。可同时做的那个正常小鼠的结果就非常好。我RNA都提了两批啦，仪器也用过ABI7500和Biorad的，我同期还做了另一个课题的皮肤组织的real time pcr也没有问题。我甚至重新做了一批肠炎小鼠，从头重新做还是不行。 想问问肠炎小鼠的RT-PCR有什么特殊之处吗？我内参都换了三种啦，这三种都是最新的跟我同品系小鼠dss肠炎模型的SCI文献中用的呀！为什么就是做不出来？ |
回复此楼» 猜你喜欢
筑牢营养安全线：以精准检测，护健康基石
已经有0人回复
-
推荐一些20种氨基酸检测的实际应用案例
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有153人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 葡聚糖硫酸钠DSS诱导小鼠溃疡性结肠炎的机制
已经有3人回复
halfbeer
捐助贵宾 (小有名气)
这是啥？
- 应助: 32 (小学生)
- 金币: 2127.3
- 帖子: 285
- 在线: 115小时
- 虫号: 3453688
- 注册: 2014-10-03
- 性别: GG
- 专业: 生物大分子结构与功能
3楼2015-07-14 08:05:26
2楼2015-07-14 00:08:11
4楼2015-07-14 12:45:19
5楼2015-10-17 13:04:04