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打败番茄炒蛋新虫 (小有名气)
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荧光原位杂交FISH 能检测降解质粒的靶基因吗？ 已有1人参与
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各位大神下午好！ 小硕是环境科学专业的，最近在做降解质粒水平基因转移的平板杂交实验。老板要求把结果用FISH通过激光共聚焦显微镜表示出来。 由于本组从没做过FISH，小硕对几个问题心里没谱，想向大神拜取经验如下： 1. 要检测位于质粒上的降解靶基因，需要什么样的荧光探针？用寡核苷酸探针的荧光强度能再荧光显微镜下观察到吗？ 2. 什么情况下需要用蛋白酶处理细菌？处理多久、用什么浓度的蛋白酶？ 3. 如果使用300bp的荧光探针，实验步骤上应该怎样加强细胞膜通透性使300bp的片段进入细胞的效率提高？ 求指点，求指教！谢谢！ |
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