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了心风

木虫 (正式写手)

[求助] 如何用拉曼检测蛋白质 已有2人参与

小弟刚开始接触拉曼,很多地方不懂,想在此请教下高手。拉曼检测蛋白质没有信号,我是直接检测样品。是拉曼不能用来检测蛋白质,还是方法不对,做过的大神请教了。
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努力!!
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gxytju2008

专家顾问 (文坛精英)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
了心风: 金币+5, ★★★很有帮助 2015-07-10 18:42:11
有一些能做,但是个人不看好,这东西基本就是打个标准谱图去对照,很难解释清楚,而且很容易受到干扰
2楼2015-07-03 11:10:34
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yukyhaoyid

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
了心风: 金币+5, ★★★很有帮助 2015-07-10 18:42:22
“拉曼检测蛋白质没有信号,我是直接检测样品”
测蛋白质不可能没有信号,多肽级别以上的峰比较多,直接出的谱图里面看着比较像一条略带弯曲的直线,需要经过软件处理去除噪声等,然后基线拉平,这个时候峰会比较明显一些,可以进行官能团以及二级结构分析。如果要初步定量分析,还需要进行归一化处理。
我也是拉曼新手,说的不一定对,希望能帮到你。
3楼2015-07-10 17:55:21
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yukyhaoyid

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
了心风: 金币+5, ★★★很有帮助 2015-07-10 18:42:45
啊,如果谱图处理正确,但峰依然不好。需要确认一下激发波长,多数蛋白质在532nm下谱图比较好,个别在七百多纳米。光栅可以考虑2400,根据谱图结果在进一步调整。
4楼2015-07-10 17:58:42
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了心风

木虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by yukyhaoyid at 2015-07-10 17:55:21
“拉曼检测蛋白质没有信号,我是直接检测样品”
测蛋白质不可能没有信号,多肽级别以上的峰比较多,直接出的谱图里面看着比较像一条略带弯曲的直线,需要经过软件处理去除噪声等,然后基线拉平,这个时候峰会比较明 ...

现在可以打出来峰了,但是峰比较乱,图很难看
努力!!
5楼2015-07-10 18:51:21
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了心风

木虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by yukyhaoyid at 2015-07-10 17:58:42
啊,如果谱图处理正确,但峰依然不好。需要确认一下激发波长,多数蛋白质在532nm下谱图比较好,个别在七百多纳米。光栅可以考虑2400,根据谱图结果在进一步调整。

我用的就是532,现在测出来可以出峰了,但是图很难看,下一步试试能不能让图好看点
努力!!
6楼2015-07-10 18:52:36
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了心风

木虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by gxytju2008 at 2015-07-03 11:10:34
有一些能做,但是个人不看好,这东西基本就是打个标准谱图去对照,很难解释清楚,而且很容易受到干扰

是啊,几次测出来的都有点不一样
努力!!
7楼2015-07-10 18:53:17
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