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superwheat

银虫 (正式写手)

[交流] 请教不同的样品溶剂是否会影响样品HPLC出峰时间和峰形,为什么呢?

再做阿霉素的含量测定,用的C18反相柱,流动相是乙腈和pH4的buffer
发现如果阿霉素如果溶解在去离子水里进样,出来一个土包,峰形难看还拖尾,但如果阿霉素溶解在酸性buffer里,峰形好得多。两者出峰时间也差了一分多钟。

我原本以为,样品进了柱子后,药物就和溶剂分开了,药物都是泡在流动向里面,应该状态一致不受样品溶剂影响才对吧?
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superwheat

银虫 (正式写手)

主要是我要检测组织样品里面的阿霉素含量,我的样品要匀浆和酸沉淀蛋白什么的,所以我就把纯阿霉素样品用相同的,含有Triton和酸的缓冲液来配。是不是这样更合理一些呢?
引用回帖:
Originally posted by shinebss at 2008-7-30 13:57:
样品一般都用流动相溶解后进样。

8楼2008-07-31 14:51:43
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fly872

金虫 (小有名气)

★ ★
dnp(金币+2,VIP+0):谢谢应助……
呵呵,看来是个色谱新手哎,并且从来没有学过色谱知识。HPLC出峰时间不仅和样品本质有关,与流动相的关系也是非常大,流动相不同,分离效果也不同。有时间的话,找本色谱的小册子看看,相信你的问题就不会这么.......了,呵呵,好好努力吧.......
2楼2008-07-30 06:35:47
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song7323

金虫 (正式写手)


dnp(金币+1,VIP+0):谢谢参与讨论^_^
HPLC出峰时间不仅和样品本质有关,与流动相的关系也是非常大,流动相不同,分离效果和出峰时间也不同。有酸的流动相出峰收敛,时间也提前(不过也是针对与某个样品)
3楼2008-07-30 06:51:10
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HPLC9001

金虫 (小有名气)


dnp(金币+1,VIP+0):谢谢~~
生物碱类物质加点碱有助于改善峰形拖尾。
人总是那里来那里去,尘归尘,土归土。
4楼2008-07-30 08:31:52
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