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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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坏坏坏孩孩孩

新虫 (小有名气)

[求助] 假阳性筛选 已有5人参与

列举两种假阳性筛选的方法,跪求

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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stone2239

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
我去,你这就是耍流氓呀。各种实验都会有假阳性,谁知道你说的是什么实验。
2楼2015-06-16 14:24:19
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坏坏坏孩孩孩

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by stone2239 at 2015-06-16 14:24:19
我去,你这就是耍流氓呀。各种实验都会有假阳性,谁知道你说的是什么实验。

好吧,就是DNA克隆的那个

[ 发自小木虫客户端 ]
3楼2015-06-16 16:36:41
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stone2239

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
坏坏坏孩孩孩(西门吹雪170代发): 金币+2, 鼓励回帖交流 2015-06-19 20:49:32
1.用通用引物做菌液PCR或菌落PCR,相较于用自己的引物做,假阳性更低。
2.如果插入片段较长,引起载体较大变化,直接提质粒跑电泳,先把大小不对的筛掉,这也是一种降低假阳性的方法。
3.送测序前酶切验证,看产物大小是否与理论值一致。
4楼2015-06-16 17:20:28
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王冠傑

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
坏坏坏孩孩孩(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-06-19 20:49:39
酶切验证比菌p出现假阳性概率低多了,通用引物比扩增引物假阳性概率高。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
5楼2015-06-16 22:46:20
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yzc937168

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
坏坏坏孩孩孩(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-06-19 20:49:52
酶切验证,测序验证
吼吼吼~
6楼2015-06-17 11:19:27
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yangjingjing

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
坏坏坏孩孩孩(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-06-19 20:49:59
插入片段引物和载体引物各一条进行扩增验证,不放心的话再插入片段引物筛选,假阳性可以降低~每次加空载对照
努力打败一切
7楼2015-06-19 10:32:45
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王平阳

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

1、通用引物菌液PCR,观察产物大小;
2、特异引物菌液PCR,观察产物亮度和特异性;
3、抽提质粒,电泳检测,观察大小;
4、抽提质粒,酶切检测;观察酶切片段大小;
5、测序检测,观察克隆片段是否为所需片段;
6、最直接方法,做蓝白斑筛选,蓝色菌斑为假阳性;
。。。。。。
方法很多的,可以单独使用,也可以综合使用,假阳性也不是特别多,一两种方法就可以了,假阳性也不会揪着我们不放的是吧
没有做不到,只有想不到!
8楼2015-06-19 20:53:24
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