| 查看: 3290 | 回复: 2 | |||
[交流]
pHT43质粒在枯草中的抗性是氨苄还是青霉素啊？ 已有2人参与
|
|
最近在做枯草，用的pHT43质粒和WB800N宿主菌。 查的文献上步骤一般是在大肠杆菌构建表达质粒，用青霉素抗性筛选，然后转化到枯草WB800N中，用氯霉素筛选； 因为pHT43质粒上带了两个抗性基因，一个是青霉素抗性，一个氯霉素抗性。 当时特意查了下，好像是在革兰氏阴性菌大肠杆菌中表现青霉素抗性，在革兰氏阳性菌枯草芽孢杆菌中表现氯霉素抗性。（好像是因为他们的σ因子不同什么的） 本来也没什么，直到我看到一篇关于枯草表达的文档：B. subtilis Recombinant Protein Expression--Procedures for inducing target gene expression and recombinant protein production in B. subtilis. 其中有这么一段： 1. Inoculate 5 ml LB media supplemented with 50 ug / ml neomycin, 20 ug / ml chloramphenical and 100 ug / ml ampicilian with WB800N(pHT43TVA-Mj) and incubate with agitation at 37 C overnight. 在WB800N(pHT43TVA-Mj)的培养时居然也加了青霉素，这让我非常不能理解，如果这也可以的话，那在转化WB800N时不就是可用青霉素筛了么，因为WB800N是不抗青霉素的啊！ |
回复此楼» 本帖附件资源列表
-
欢迎监督和反馈：小木虫仅提供交流平台，不对该内容负责。
本内容由用户自主发布，如果其内容涉及到知识产权问题，其责任在于用户本人，如对版权有异议，请联系邮箱：xiaomuchong@tal.com - 附件 1 : WB800N.pdf
2015-06-15 16:55:36, 73.34 K
» 猜你喜欢
推荐一些20种氨基酸检测的实际应用案例
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有226人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
luwei13566
木虫 (正式写手)
- MolEPI: 3
- 应助: 184 (高中生)
- 金币: 4350.4
- 散金: 97
- 红花: 35
- 帖子: 641
- 在线: 261.1小时
- 虫号: 2380655
- 注册: 2013-03-27
- 性别: GG
- 专业: 微生物生理与生物化学
2楼2015-06-15 18:47:52
aoaoshch
木虫 (小有名气)
- 应助: 18 (小学生)
- 金币: 2646.2
- 红花: 3
- 帖子: 153
- 在线: 105小时
- 虫号: 800123
- 注册: 2009-06-28
- 性别: GG
- 专业: 生物化学
3楼2015-06-17 10:52:38
10