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pHT43质粒在枯草中的抗性是氨苄还是青霉素啊？ 已有2人参与
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最近在做枯草，用的pHT43质粒和WB800N宿主菌。 查的文献上步骤一般是在大肠杆菌构建表达质粒，用青霉素抗性筛选，然后转化到枯草WB800N中，用氯霉素筛选； 因为pHT43质粒上带了两个抗性基因，一个是青霉素抗性，一个氯霉素抗性。 当时特意查了下，好像是在革兰氏阴性菌大肠杆菌中表现青霉素抗性，在革兰氏阳性菌枯草芽孢杆菌中表现氯霉素抗性。（好像是因为他们的σ因子不同什么的） 本来也没什么，直到我看到一篇关于枯草表达的文档：B. subtilis Recombinant Protein Expression--Procedures for inducing target gene expression and recombinant protein production in B. subtilis. 其中有这么一段： 1. Inoculate 5 ml LB media supplemented with 50 ug / ml neomycin, 20 ug / ml chloramphenical and 100 ug / ml ampicilian with WB800N(pHT43TVA-Mj) and incubate with agitation at 37 C overnight. 在WB800N(pHT43TVA-Mj)的培养时居然也加了青霉素，这让我非常不能理解，如果这也可以的话，那在转化WB800N时不就是可用青霉素筛了么，因为WB800N是不抗青霉素的啊！ |
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2015-06-15 16:55:36, 73.34 K
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