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lxiaxia0519

新虫 (小有名气)

[求助] 双抗夹心法梯度浓度标准品实验结果无变化,求大家帮忙分析原因 已有3人参与

最近做双抗体夹心,一抗通过戊二醛交联在二氧化硅基质上,二抗用荧光素标记。配置一系列标准品抗原浓度,7.8ng/mL--780ng/mL,结果无梯度变化,和空白值(不加抗原,直接加二抗)接近,根据此实验,能否说明抗原抗体之间结合不上?值得一提的是,今年2月份使用该方法时,结果是正常的,已经做出了抗原的浓度线性曲线,从3月份开始响应信号就没有梯度变化了,从同一家公司又买了一批新的抗原,用了几天就又测不到信号了。联系抗原公司后,那边又给发了新的一抗、抗原、二抗,还是测不到信号。抗原抗体都是按说明书上的条件保存的,也没有反复冻融。于是又从别的公司买了一份抗原(固体的),结果依然无梯度变化。
2个月来实验没有一点进展,都快抑郁了,跪求各位前辈帮帮忙给点意见吧!
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王彬2014

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
估计是你抗体浓度太小,量少,抗原浓度远大于抗体浓度
回顾回想回眸
4楼2015-06-18 08:24:43
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