24小时热门版块排行榜    

查看: 3485  |  回复: 11
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

小肉团子

金虫 (小有名气)

[求助] MTT测细胞增殖应该选用几个时间点?CCK-8呢?表征改性后钛表面的生物相容性。 已有7人参与

我是做钛表面改性的,现在想表征其生物相容性,准备做细胞增殖实验,但是不知道该选用哪一种。现有两种:MTT和CCK-8,但是很多疑问:
1、关于方法选择:CCK-8方法比较便捷、灵敏,但是为什么现有的做生物材料的文献中很少有用CCK-8的,是因为CCK-8不同时间长度的不能比较吗?
2、关于时间点选择:文献中做MTT的,有用1个,2个还有3-5个时间点的,这个应该怎么选择呢? 如果用CCK-8又需要做几个时间点呢?
3、无论哪种方法,一般需要重复几次数据才算有效呢?
本人学材料的,对生物方面了解甚少,最近因为这些问题很苦恼,又比较着急知道,查了很多查不到答案,还请各位前辈虫友们赐教!真得很感谢!!
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xujiliang

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
小肉团子: 金币+4, 有帮助, 谢谢 2015-06-15 15:50:47
我也是做钛材表面修饰的,我建议用CCK-8检测细胞的增殖活性,比MTT好,也不是很贵,效果好。时间点一般选择的是1,3,5,7,11天就可以了,也有2,4,6,8天,具体的要看你的细胞的增值曲线是什么样的,以及你用的是什么细胞。我们一般要重复实验3次,每次设置的平行组有5个,5个数值之间取平均数。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
5楼2015-06-14 16:42:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 12 个回答

likedong1021

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小肉团子(markar代发): 金币+2, 赞一个! 2015-06-13 20:36:36
小肉团子: 金币+8, ★★★很有帮助 2015-06-15 09:13:00
问题1,CCK-8的原理跟MTT相似,不同之处在于CCK-8法生成的formazan是水溶性的,不需要再吸出培养液加入有机溶剂溶解这个步骤,因此可以减少一定的误差。其他优点就是重复性优于MTT;对细胞毒性小。但是CCK-8比MTT的价格要贵不少,所以一般来说,还是MTT法用的多。
问题2,没有明白你说的时间点是什么,是测量周期么?这个应该和你选择的细胞有关
问题3,材料一般要做3个重复样,每个重复样还要做3个MTT或者CCK-8
希望可以帮到你
大家都走的路并不一定适合你,遭他人侧目有两种可能,一种是你疯了,一种是他们疯了
2楼2015-06-12 06:19:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xingxin02

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
markar: 金币+2, 干得漂亮! 2015-06-13 20:36:59
小肉团子: 金币+6, ★★★很有帮助, 很认真,谢谢 2015-06-15 15:49:49
第一点,如楼上所说MTT比较经典,便宜,不过CCK-8也不是很贵(相对于动辄两三千块的抗体来说),CCK-8价格是几百块吧,CCK-8操作简单,不需要溶解这一步,而且染色后更换培养基,细胞可以继续养。
第二点,无论是MTT还是CCK-8,做细胞的增殖实验(或是生长曲线),肯定是需要检测多个时间点的,比如1天,3天,5天,7天。一个时间点的,那可能是细胞毒性实验,比如说不同浓度药物对细胞毒性的影响,加入不同浓度的药物,培养24h(根据药物情况,一般24h或者48h)。
第三点,每个孔至少有三个副孔。
3楼2015-06-12 14:47:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

勿空

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小肉团子: 金币+5, ★★★很有帮助, 谢谢 2015-06-15 15:50:17
小肉团子: 金币+2 2015-06-19 09:31:01
1、我们以前用的MTT,后来用的CCK-8比较多。相对来说,CCK-8更加灵敏,更加便捷,但是价格稍微贵点
2、时间点是根据你的实验安排的,最好看看相关的参考文献。一般有1天、4天、7天,或者7天、14天。
3、平行样本的话当然越多越好,但是为了实验简便和科学需要,一般至少做3个,我们一般做5-6个,减少误差。
小虫是做生物医用钛材研究的,诚恳向各位前辈请教
4楼2015-06-14 11:16:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 综述论文作为代表作会不会影响评审专家的印象分? +11 yufeiwaner 2026-08-09 12/600 2026-08-12 01:27 by 南京中西医
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见,大家看看几个A,几个B? +4 Tide man 2026-08-11 4/200 2026-08-12 00:39 by liuqidi
[基金申请] 有时候,自然基金真的不能太认真 (我的申报经验) +3 majunge000 2026-08-11 4/200 2026-08-11 20:13 by lch2012
[基金申请] 为什么网上很多人说本周 12号出结果 +6 瞬息宇宙 2026-08-10 7/350 2026-08-11 19:25 by Tide man
[基金申请] 什么时候出结果,有咨询渠道??? +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
[论文投稿] 职称评审,求友友推荐见刊最快的期刊 +3 工厂打螺丝 2026-08-08 3/150 2026-08-11 13:42 by 会议编辑
[基金申请] filecode +9 documentary 2026-08-10 9/450 2026-08-11 10:08 by wk7465
[基金申请] 我的国基提前知道中了,可是同事的操作让我实在接受不了,怎么会有这样的人 +8 家与远方 2026-08-10 13/650 2026-08-11 09:49 by 家与远方
[基金申请] 关于Filecode分析方法 +3 majunge000 2026-08-10 3/150 2026-08-10 15:46 by lch2012
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
[基金申请] 据悉今年马上要出结果了 +7 瞬息宇宙 2026-08-10 8/400 2026-08-10 12:42 by Vivilian
[基金申请] 2026国自然放榜时间 +9 布布和一二 2026-08-08 9/450 2026-08-10 11:22 by xxxx2020
[基金申请] filecode与中标关系的预测 +5 布布和一二 2026-08-07 5/250 2026-08-09 16:15 by 袁向阳007
[基金申请] fileCode有新解读? +10 Tide man 2026-08-08 18/900 2026-08-09 12:55 by 仁砚薪传
[基金申请] 关于豆爷回答的JTJC与%2F数量 +5 yang182083 2026-08-06 7/350 2026-08-08 18:29 by zhanghaozhu
[基金申请] 国基金的申报应该改成非等额制,评价高的钱多评价低的钱少,但是增加资助率 +7 a089 2026-08-07 7/350 2026-08-08 18:05 by gltch
[基金申请] filecode变化情况 +6 布布和一二 2026-08-07 22/1100 2026-08-07 14:45 by 且听虎啸
[基金申请] 大家散了吧,后缀研究没有意义,别浪费时间了,过好目前的每一天,不要焦虑 +5 Tide man 2026-08-06 7/350 2026-08-07 13:11 by 医学老男孩
[基金申请] filecode +8 布布和一二 2026-08-06 11/550 2026-08-06 20:41 by tangpu318
[基金申请] 好消息?这个有何含义??? +8 Tide man 2026-08-05 10/500 2026-08-05 16:14 by xmuxiaoyu
信息提示
请填处理意见