24小时热门版块排行榜    

查看: 2811  |  回复: 11

小肉团子

金虫 (小有名气)

[求助] MTT测细胞增殖应该选用几个时间点?CCK-8呢?表征改性后钛表面的生物相容性。已有7人参与

我是做钛表面改性的,现在想表征其生物相容性,准备做细胞增殖实验,但是不知道该选用哪一种。现有两种:MTT和CCK-8,但是很多疑问:
1、关于方法选择:CCK-8方法比较便捷、灵敏,但是为什么现有的做生物材料的文献中很少有用CCK-8的,是因为CCK-8不同时间长度的不能比较吗?
2、关于时间点选择:文献中做MTT的,有用1个,2个还有3-5个时间点的,这个应该怎么选择呢? 如果用CCK-8又需要做几个时间点呢?
3、无论哪种方法,一般需要重复几次数据才算有效呢?
本人学材料的,对生物方面了解甚少,最近因为这些问题很苦恼,又比较着急知道,查了很多查不到答案,还请各位前辈虫友们赐教!真得很感谢!!
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

xingxin02

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
markar: 金币+2, 干得漂亮! 2015-06-13 20:36:59
小肉团子: 金币+6, ★★★很有帮助, 很认真,谢谢 2015-06-15 15:49:49
第一点,如楼上所说MTT比较经典,便宜,不过CCK-8也不是很贵(相对于动辄两三千块的抗体来说),CCK-8价格是几百块吧,CCK-8操作简单,不需要溶解这一步,而且染色后更换培养基,细胞可以继续养。
第二点,无论是MTT还是CCK-8,做细胞的增殖实验(或是生长曲线),肯定是需要检测多个时间点的,比如1天,3天,5天,7天。一个时间点的,那可能是细胞毒性实验,比如说不同浓度药物对细胞毒性的影响,加入不同浓度的药物,培养24h(根据药物情况,一般24h或者48h)。
第三点,每个孔至少有三个副孔。
3楼2015-06-12 14:47:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

likedong1021

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小肉团子(markar代发): 金币+2, 赞一个! 2015-06-13 20:36:36
小肉团子: 金币+8, ★★★很有帮助 2015-06-15 09:13:00
问题1,CCK-8的原理跟MTT相似,不同之处在于CCK-8法生成的formazan是水溶性的,不需要再吸出培养液加入有机溶剂溶解这个步骤,因此可以减少一定的误差。其他优点就是重复性优于MTT;对细胞毒性小。但是CCK-8比MTT的价格要贵不少,所以一般来说,还是MTT法用的多。
问题2,没有明白你说的时间点是什么,是测量周期么?这个应该和你选择的细胞有关
问题3,材料一般要做3个重复样,每个重复样还要做3个MTT或者CCK-8
希望可以帮到你
大家都走的路并不一定适合你,遭他人侧目有两种可能,一种是你疯了,一种是他们疯了
2楼2015-06-12 06:19:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xujiliang

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
小肉团子: 金币+4, 有帮助, 谢谢 2015-06-15 15:50:47
我也是做钛材表面修饰的,我建议用CCK-8检测细胞的增殖活性,比MTT好,也不是很贵,效果好。时间点一般选择的是1,3,5,7,11天就可以了,也有2,4,6,8天,具体的要看你的细胞的增值曲线是什么样的,以及你用的是什么细胞。我们一般要重复实验3次,每次设置的平行组有5个,5个数值之间取平均数。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
5楼2015-06-14 16:42:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

勿空

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小肉团子: 金币+5, ★★★很有帮助, 谢谢 2015-06-15 15:50:17
小肉团子: 金币+2 2015-06-19 09:31:01
1、我们以前用的MTT,后来用的CCK-8比较多。相对来说,CCK-8更加灵敏,更加便捷,但是价格稍微贵点
2、时间点是根据你的实验安排的,最好看看相关的参考文献。一般有1天、4天、7天,或者7天、14天。
3、平行样本的话当然越多越好,但是为了实验简便和科学需要,一般至少做3个,我们一般做5-6个,减少误差。
小虫是做生物医用钛材研究的,诚恳向各位前辈请教
4楼2015-06-14 11:16:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

_学在深巷丶

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

一般都是1  3  5  7天吧

[ 发自小木虫客户端 ]
学在深巷
6楼2015-06-15 10:31:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gzh494266

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

前几帖基本都已经解决了你的问题,时下确实很少有人用MTT了,所以你果断选择CCK8就好~
静心
7楼2015-06-15 16:43:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小肉团子

金虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 勿空 at 2015-06-14 11:16:13
1、我们以前用的MTT,后来用的CCK-8比较多。相对来说,CCK-8更加灵敏,更加便捷,但是价格稍微贵点
2、时间点是根据你的实验安排的,最好看看相关的参考文献。一般有1天、4天、7天,或者7天、14天。
3、平行样本的 ...

可是CCK8不是一般选择在1左右测试吗? 如果是这样,为了保证结果准确,那就只能同一时间段的不同组之间比较,而不能对不同时间点之间进行比较了
8楼2015-06-16 09:11:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小肉团子

金虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by xujiliang at 2015-06-14 16:42:59
我也是做钛材表面修饰的,我建议用CCK-8检测细胞的增殖活性,比MTT好,也不是很贵,效果好。时间点一般选择的是1,3,5,7,11天就可以了,也有2,4,6,8天,具体的要看你的细胞的增值曲线是什么样的,以及你用的是什么 ...

重复3次,5个平行组,意思就是每个数据的背后有15个数据了?
9楼2015-06-16 15:56:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

莫慧燕

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 勿空 at 2015-06-14 11:16:13
1、我们以前用的MTT,后来用的CCK-8比较多。相对来说,CCK-8更加灵敏,更加便捷,但是价格稍微贵点
2、时间点是根据你的实验安排的,最好看看相关的参考文献。一般有1天、4天、7天,或者7天、14天。
3、平行样本的 ...

各位牛人,我是初学者,我想请教一下,做cck8时,除了加药组,两个对照组(培养基+cck8、细胞+培养基+cck8)外,是否还需要做空白?空白怎么做呢?谢谢!
我自信我成功
10楼2015-09-08 16:08:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 小肉团子 的主题更新
信息提示
请填处理意见