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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 材料区 » 生物材料 » 金属生物材料 » MTT测细胞增殖应该选用几个时间点？CCK-8呢？表征改性后钛表面的生物相容性。
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小肉团子

金虫 (小有名气)

[求助] MTT测细胞增殖应该选用几个时间点？CCK-8呢？表征改性后钛表面的生物相容性。 已有7人参与

我是做钛表面改性的，现在想表征其生物相容性，准备做细胞增殖实验，但是不知道该选用哪一种。现有两种：MTT和CCK-8，但是很多疑问：
1、关于方法选择：CCK-8方法比较便捷、灵敏，但是为什么现有的做生物材料的文献中很少有用CCK-8的，是因为CCK-8不同时间长度的不能比较吗？
2、关于时间点选择：文献中做MTT的，有用1个,2个还有3-5个时间点的，这个应该怎么选择呢？ 如果用CCK-8又需要做几个时间点呢？
3、无论哪种方法，一般需要重复几次数据才算有效呢？
本人学材料的，对生物方面了解甚少，最近因为这些问题很苦恼，又比较着急知道，查了很多查不到答案，还请各位前辈虫友们赐教！真得很感谢！！
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1楼 2015-06-11 16:06:29
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xingxin02

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
markar: 金币+2, 干得漂亮！ 2015-06-13 20:36:59
小肉团子: 金币+6, ★★★很有帮助, 很认真，谢谢 2015-06-15 15:49:49
第一点，如楼上所说MTT比较经典，便宜，不过CCK-8也不是很贵（相对于动辄两三千块的抗体来说），CCK-8价格是几百块吧，CCK-8操作简单，不需要溶解这一步，而且染色后更换培养基，细胞可以继续养。
第二点，无论是MTT还是CCK-8，做细胞的增殖实验（或是生长曲线），肯定是需要检测多个时间点的，比如1天，3天，5天，7天。一个时间点的，那可能是细胞毒性实验，比如说不同浓度药物对细胞毒性的影响，加入不同浓度的药物，培养24h（根据药物情况，一般24h或者48h）。
第三点，每个孔至少有三个副孔。
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3楼2015-06-12 14:47:47
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likedong1021

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小肉团子(markar代发): 金币+2, 赞一个！ 2015-06-13 20:36:36
小肉团子: 金币+8, ★★★很有帮助 2015-06-15 09:13:00
问题1，CCK-8的原理跟MTT相似，不同之处在于CCK-8法生成的formazan是水溶性的，不需要再吸出培养液加入有机溶剂溶解这个步骤，因此可以减少一定的误差。其他优点就是重复性优于MTT；对细胞毒性小。但是CCK-8比MTT的价格要贵不少，所以一般来说，还是MTT法用的多。
问题2，没有明白你说的时间点是什么，是测量周期么？这个应该和你选择的细胞有关
问题3，材料一般要做3个重复样，每个重复样还要做3个MTT或者CCK-8
希望可以帮到你
赞一下(1人) 回复此楼
大家都走的路并不一定适合你，遭他人侧目有两种可能，一种是你疯了，一种是他们疯了
2楼2015-06-12 06:19:26
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勿空

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小肉团子: 金币+5, ★★★很有帮助, 谢谢 2015-06-15 15:50:17
小肉团子: 金币+2 2015-06-19 09:31:01
1、我们以前用的MTT，后来用的CCK-8比较多。相对来说，CCK-8更加灵敏，更加便捷，但是价格稍微贵点
2、时间点是根据你的实验安排的，最好看看相关的参考文献。一般有1天、4天、7天，或者7天、14天。
3、平行样本的话当然越多越好，但是为了实验简便和科学需要，一般至少做3个，我们一般做5-6个，减少误差。
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小虫是做生物医用钛材研究的，诚恳向各位前辈请教
4楼2015-06-14 11:16:13
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xujiliang

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
小肉团子: 金币+4, ★有帮助, 谢谢 2015-06-15 15:50:47
我也是做钛材表面修饰的，我建议用CCK-8检测细胞的增殖活性，比MTT好，也不是很贵，效果好。时间点一般选择的是1,3,5,7，11天就可以了，也有2,4，6，8天，具体的要看你的细胞的增值曲线是什么样的，以及你用的是什么细胞。我们一般要重复实验3次，每次设置的平行组有5个，5个数值之间取平均数。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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5楼2015-06-14 16:42:59
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