应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 改造载体
71/1返回列表
查看: 1275  |  回复: 6
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

wuwenmei

新虫 (小有名气)

[求助] 改造载体 已有3人参与

碰到大麻烦了，老板让我设计一个分泌性表达方案，对载体进行改造，自己的目的序列来自真核生物，富含二硫键，之前试过加SUMO表达，表达量不高，现在的想法是看看能不能加一个信号肽使其分泌到周质或者胞外，不知道各位有没有做过，能不能指点一二，信号肽好多，该怎么选择？启动子应该怎么修改？？请过来人指点一番，谢谢啦，，
回复此楼

» 猜你喜欢
下雨天就算没有伞，我也要学会努力奔跑！
1楼 2015-06-09 21:00:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

跳跳豆芽

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

你是如何确定目的蛋白含有二硫键的啊？我的是基因是来自于植物的，表达量也提不上去，pet28b表达几乎都是包涵体，正准备换一个含SUMO的载体
赞一下 回复此楼
学无止境
2楼2015-07-08 20:05:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wuwenmei

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 跳跳豆芽 at 2015-07-08 20:05:54
你是如何确定目的蛋白含有二硫键的啊？我的是基因是来自于植物的，表达量也提不上去，pet28b表达几乎都是包涵体，正准备换一个含SUMO的载体

以前有分析过这个蛋白

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
下雨天就算没有伞，我也要学会努力奔跑！
3楼2015-07-08 20:46:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

halfbeer

捐助贵宾 (小有名气)

这是啥？

【答案】应助回帖

为什么一定要设计载体呢，可以用现成的载体，pPIC9K就是分泌型的，也可以表达真核的蛋白
赞一下 回复此楼
现在我们能做的就是努力努力再努力
4楼2015-07-09 09:15:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wuwenmei

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by halfbeer at 2015-07-09 09:15:35
为什么一定要设计载体呢，可以用现成的载体，pPIC9K就是分泌型的，也可以表达真核的蛋白

求载体一试

[ 发自小木虫客户端 ]
回复此楼
下雨天就算没有伞，我也要学会努力奔跑！
5楼2015-07-09 10:21:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

biosci

捐助贵宾 (知名作家)

【答案】应助回帖

商家已经主动声明此回帖可能含有宣传内容
需要载体，联系我啊，我这里有的是
赞一下 回复此楼
6楼2015-07-09 10:47:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wuwenmei

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by halfbeer at 2015-07-09 09:15:35
为什么一定要设计载体呢，可以用现成的载体，pPIC9K就是分泌型的，也可以表达真核的蛋白

我的蛋白只有5kDA左右，也可以吗？要是行，希望你能惠赠一点给我尝试下，谢谢

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
下雨天就算没有伞，我也要学会努力奔跑！
7楼2015-07-10 12:16:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 wuwenmei 的主题更新
71/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 据悉今年马上要出结果了 +5 瞬息宇宙 2026-08-10 6/300 2026-08-10 10:38 by Tide man
[基金申请] 2026国自然放榜时间 +7 布布和一二 2026-08-08 7/350 2026-08-10 10:26 by allmydream
[基金申请] 关于代码变化问题，想知道的进来 +15 且听虎啸 2026-08-07 22/1100 2026-08-09 22:13 by 布布和一二
[基金申请] 这样的filecode谁见过 +10 布布和一二 2026-08-08 21/1050 2026-08-09 17:21 by 天神眷顾
[基金申请] filecode与中标关系的预测 +5 布布和一二 2026-08-07 5/250 2026-08-09 16:15 by 袁向阳007
[基金申请] 好奇怪的filecode +3 布布和一二 2026-08-08 4/200 2026-08-08 17:46 by zhanghaozhu
[基金申请] 基金中了 +14 laoda193707 2026-08-06 14/700 2026-08-08 00:23 by 实验小白ha
[基金申请] 关于filecode +4 布布和一二 2026-08-07 7/350 2026-08-07 22:55 by zhanghaozhu
[基金申请] 娱乐 +6 Tide man 2026-08-03 6/300 2026-08-07 22:40 by 铁帽子农民
[基金申请] 固定端突然变了，今天 +6 archvillain 2026-08-06 10/500 2026-08-07 16:03 by 医学老男孩
[基金申请] 听说今天filecode变了 +24 布布和一二 2026-08-06 47/2350 2026-08-07 16:02 by zhiyanjiang
[基金申请] filecode变化情况 +6 布布和一二 2026-08-07 22/1100 2026-08-07 14:45 by 且听虎啸
[基金申请] 大家散了吧，后缀研究没有意义，别浪费时间了，过好目前的每一天，不要焦虑 +5 Tide man 2026-08-06 7/350 2026-08-07 13:11 by 医学老男孩
[基金申请] filecode +14 等待解的谜 2026-08-06 19/950 2026-08-07 12:20 by wlwhappy
[基金申请] filecode +8 布布和一二 2026-08-06 11/550 2026-08-06 20:41 by tangpu318
[基金申请] 求各位大神看下 100+6 hpkpkpkp 2026-08-05 33/1650 2026-08-06 14:49 by zhiyanjiang
[基金申请] 8月时间戳变的，举个手。玩一下，释放压力 +9 archvillain 2026-08-04 11/550 2026-08-05 20:06 by wlwhappy
[基金申请] 好消息？这个有何含义？？？ +8 Tide man 2026-08-05 10/500 2026-08-05 16:14 by xmuxiaoyu
[基金申请] 纯娱乐，不喜欢勿喷 +7 Tide man 2026-08-04 10/500 2026-08-04 15:10 by loufangrui
[基金申请] 什么时候能放榜呀？ +3 Jacob678 2026-08-03 3/150 2026-08-03 16:14 by gltch
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭