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wuwenmei

新虫 (小有名气)

[求助] 改造载体 已有3人参与

碰到大麻烦了,老板让我设计一个分泌性表达方案,对载体进行改造,自己的目的序列来自真核生物,富含二硫键,之前试过加SUMO表达,表达量不高,现在的想法是看看能不能加一个信号肽使其分泌到周质或者胞外,不知道各位有没有做过,能不能指点一二,信号肽好多,该怎么选择?启动子应该怎么修改??请过来人指点一番,谢谢啦,,
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下雨天就算没有伞,我也要学会努力奔跑!
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跳跳豆芽

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

你是如何确定目的蛋白含有二硫键的啊?我的是基因是来自于植物的,表达量也提不上去,pet28b表达几乎都是包涵体,正准备换一个含SUMO的载体
学无止境
2楼2015-07-08 20:05:54
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wuwenmei

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 跳跳豆芽 at 2015-07-08 20:05:54
你是如何确定目的蛋白含有二硫键的啊?我的是基因是来自于植物的,表达量也提不上去,pet28b表达几乎都是包涵体,正准备换一个含SUMO的载体

以前有分析过这个蛋白

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3楼2015-07-08 20:46:10
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halfbeer

捐助贵宾 (小有名气)

这是啥?

【答案】应助回帖

为什么一定要设计载体呢,可以用现成的载体,pPIC9K就是分泌型的,也可以表达真核的蛋白
现在我们能做的就是努力努力再努力
4楼2015-07-09 09:15:35
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wuwenmei

新虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by halfbeer at 2015-07-09 09:15:35
为什么一定要设计载体呢,可以用现成的载体,pPIC9K就是分泌型的,也可以表达真核的蛋白

求载体一试

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5楼2015-07-09 10:21:20
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biosci

捐助贵宾 (知名作家)


【答案】应助回帖

商家已经主动声明此回帖可能含有宣传内容
需要载体,联系我啊,我这里有的是
6楼2015-07-09 10:47:24
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wuwenmei

新虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by halfbeer at 2015-07-09 09:15:35
为什么一定要设计载体呢,可以用现成的载体,pPIC9K就是分泌型的,也可以表达真核的蛋白

我的蛋白只有5kDA左右,也可以吗?要是行,希望你能惠赠一点给我尝试下,谢谢

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7楼2015-07-10 12:16:24
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