应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 改造载体
71/1返回列表
查看: 1312  |  回复: 6
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

wuwenmei

新虫 (小有名气)

[求助] 改造载体 已有3人参与

碰到大麻烦了，老板让我设计一个分泌性表达方案，对载体进行改造，自己的目的序列来自真核生物，富含二硫键，之前试过加SUMO表达，表达量不高，现在的想法是看看能不能加一个信号肽使其分泌到周质或者胞外，不知道各位有没有做过，能不能指点一二，信号肽好多，该怎么选择？启动子应该怎么修改？？请过来人指点一番，谢谢啦，，
回复此楼

» 猜你喜欢
下雨天就算没有伞，我也要学会努力奔跑！
1楼 2015-06-09 21:00:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

跳跳豆芽

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

你是如何确定目的蛋白含有二硫键的啊？我的是基因是来自于植物的，表达量也提不上去，pet28b表达几乎都是包涵体，正准备换一个含SUMO的载体
赞一下 回复此楼
学无止境
2楼2015-07-08 20:05:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wuwenmei

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 跳跳豆芽 at 2015-07-08 20:05:54
你是如何确定目的蛋白含有二硫键的啊？我的是基因是来自于植物的，表达量也提不上去，pet28b表达几乎都是包涵体，正准备换一个含SUMO的载体

以前有分析过这个蛋白

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
下雨天就算没有伞，我也要学会努力奔跑！
3楼2015-07-08 20:46:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

halfbeer

捐助贵宾 (小有名气)

这是啥？

【答案】应助回帖

为什么一定要设计载体呢，可以用现成的载体，pPIC9K就是分泌型的，也可以表达真核的蛋白
赞一下 回复此楼
现在我们能做的就是努力努力再努力
4楼2015-07-09 09:15:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wuwenmei

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by halfbeer at 2015-07-09 09:15:35
为什么一定要设计载体呢，可以用现成的载体，pPIC9K就是分泌型的，也可以表达真核的蛋白

求载体一试

[ 发自小木虫客户端 ]
回复此楼
下雨天就算没有伞，我也要学会努力奔跑！
5楼2015-07-09 10:21:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

biosci

捐助贵宾 (知名作家)

【答案】应助回帖

商家已经主动声明此回帖可能含有宣传内容
需要载体，联系我啊，我这里有的是
赞一下 回复此楼
6楼2015-07-09 10:47:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wuwenmei

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by halfbeer at 2015-07-09 09:15:35
为什么一定要设计载体呢，可以用现成的载体，pPIC9K就是分泌型的，也可以表达真核的蛋白

我的蛋白只有5kDA左右，也可以吗？要是行，希望你能惠赠一点给我尝试下，谢谢

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
下雨天就算没有伞，我也要学会努力奔跑！
7楼2015-07-10 12:16:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 wuwenmei 的主题更新
71/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 FChKX8meu1ds 2026-11-09 5/250 2026-11-11 04:40 by Z7qfCsdIiD1T
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 zSbvVX9JFl9J 2026-11-09 6/300 2026-11-11 03:59 by Z7qfCsdIiD1T
[硕博家园] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 zSbvVX9JFl9J 2026-11-09 6/300 2026-11-11 03:56 by Z7qfCsdIiD1T
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +4 FChKX8meu1ds 2026-11-09 6/300 2026-11-11 01:54 by Z7qfCsdIiD1T
[教师之家] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +4 0TEMgxdT1eIw 2026-11-09 6/300 2026-11-11 01:13 by Z7qfCsdIiD1T
[考研] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +4 0TEMgxdT1eIw 2026-11-09 6/300 2026-11-11 01:10 by Z7qfCsdIiD1T
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 zSbvVX9JFl9J 2026-11-09 6/300 2026-11-11 01:02 by Z7qfCsdIiD1T
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 FChKX8meu1ds 2026-11-09 4/200 2026-11-10 20:51 by Z7qfCsdIiD1T
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 cqv1zKnzd7hr 2026-11-09 5/250 2026-11-10 20:45 by Z7qfCsdIiD1T
[硕博家园] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 cqv1zKnzd7hr 2026-11-09 4/200 2026-11-10 20:07 by Z7qfCsdIiD1T
[考博] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 zSbvVX9JFl9J 2026-11-09 4/200 2026-11-10 01:29 by FChKX8meu1ds
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +5 kvewwGtKktqB 2026-11-04 12/600 2026-11-09 13:26 by Equinoxhua
[考研] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 15/750 2026-11-09 13:19 by Equinoxhua
[考博] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +5 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 15/750 2026-11-09 11:41 by GwrQVVR6Oenx
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 12/600 2026-11-09 06:32 by l48hFd8Nwae2
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +5 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 9/450 2026-11-08 22:46 by l48hFd8Nwae2
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +5 kvewwGtKktqB 2026-11-04 14/700 2026-11-06 05:10 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +6 kvewwGtKktqB 2026-11-04 16/800 2026-11-06 05:00 by qL1cU46YIdK0
[考博] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 7/350 2026-11-06 02:13 by qL1cU46YIdK0
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 10/500 2026-11-06 02:04 by qL1cU46YIdK0
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭