应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 新药研发 » 资料求助 » Agilent HPLC1260 每一针都比上一针出峰提前近一分钟
271/3返回列表123下一页
查看: 3269  |  回复: 26
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

roid617

木虫 (著名写手)

[求助] Agilent HPLC1260 每一针都比上一针出峰提前近一分钟 已有15人参与

如上：
        检测人参皂苷Rb1，中检所对照品，浓度0.4mg/ml，现配
      流动相：乙腈：0.1%磷酸水（32:68），检测波长203nm，柱温30℃。停止时间30min。
      如下图所示，对照品连续进样，每针没上一针提前近1min出峰，色谱柱是岛津的C18柱，更换过同种类的，效果一样。
    液相应该没问题，之前同事测的其他成分出峰正常。难道是人参皂苷Rb1的原因？

Agilent HPLC1260 每一针都比上一针出峰提前近一分钟
ELR5ZTOH1S()]5307NP_ZW6.jpg
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

新药研发必备资料

» 猜你喜欢
1楼 2015-06-09 09:35:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

lionguy

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
由液相比例阀控制的各个通道的流动相比例可能不准了。
液相比例阀的日常维护保养
1、不要在个通道内存放水，每次使用结束时，清洗完色谱柱之后，必须将通道内的水置换成甲醇；否则，一旦水中长菌，菌丝体会堵塞色谱柱，而且无法将其清洗出来。
2、不要在个通道内存放乙腈，每次使用结束时，清洗完色谱柱之后，必须将通道内的乙腈置换成甲醇；否则，乙腈在通道中长期存放，由于其对橡胶有溶胀作用，时间太久了就会导致比例阀的橡胶密封圈溶胀，从而导致比例阀输出的流动相比例不再准确了。
3、HPLC仪器每隔3个月，建议用70度的高纯热水一次高速冲洗各个通道，冲洗结束后再将各个通道中置换成甲醇。
    日常做好HPLC和色谱柱的养护，工作时仪器设备就不会出洋相。多年来，我用的仪器基本上不出问题，当然，正常的更换能量不足的紫外灯、以及滤芯等不算在内。
赞一下(5人) 回复此楼
16楼2015-06-10 10:30:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

roid617

木虫 (著名写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by mxx7456 at 2015-06-09 10:57:41
1.系统是否已经稳定
2.流动相的PH你测测看看是不是有差异，并且柱子是否适用
3.流动相是否新鲜
4.样品是否稳定

有可能是岛津的色谱柱不适用 准备换柱子试试
赞一下(1人) 回复此楼
9楼2015-06-09 11:16:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

XYGZ05

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

流动相按比例配好，单相进样试一下。
赞一下(1人) 回复此楼
13楼2015-06-09 14:08:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hr.wu

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
之前我碰到过类似问题，后来发现原因是比例阀出现问题，比如设定抽取B通道，但是在同时A通道的流动相也在进入系统，结果就是实际的流动相比例在不断改变，同样的对照品出峰一针比一针晚。建议你试验一下是否也有相同的问题。假如你是把有机相和水相混合后单通道进流动相，这时你把另外三个通道过滤头提起来，进去一小段空气，再放回去，看看在运行时三个气泡在管道中是否运动就知道了。
赞一下(1人) 回复此楼
17楼2015-06-10 10:58:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

XYGZ05

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
roid617: 金币+1 2015-06-09 10:45:42
可能是柱子原因，换根其他牌子的柱子试试。
赞一下 回复此楼
2楼2015-06-09 10:18:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jinianwei

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
roid617: 金币+1 2015-06-09 10:45:37
柱压稳定吗？也有可能是液相比例阀坏了
赞一下 回复此楼
人生需要努力
3楼2015-06-09 10:41:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

roid617

木虫 (著名写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by jinianwei at 2015-06-09 10:41:20
柱压稳定吗？也有可能是液相比例阀坏了

柱压稳定的 液相之前用的事正常的 比例阀应该没问题
赞一下 回复此楼
4楼2015-06-09 10:46:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

roid617

木虫 (著名写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by XYGZ05 at 2015-06-09 10:18:43
可能是柱子原因，换根其他牌子的柱子试试。

这个有可能 我在准备其他品牌的柱子试试
赞一下 回复此楼
5楼2015-06-09 10:47:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

duliuhui

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
roid617: 金币+2 2015-06-09 11:14:01
是不是色谱柱没有平衡好，继续观察看看吧。
还有以前做过吗，是以前正常现在头一次发生？还是头一次做这个实验发现的情况，需区别对待。
还有考虑是否温度等的影响，有时某些成分对环境温度也很敏感。多方面考虑一下可能的因素。
赞一下 回复此楼
6楼2015-06-09 10:52:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mxx7456

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
roid617: 金币+2 2015-06-09 11:13:47
1.系统是否已经稳定
2.流动相的PH你测测看看是不是有差异，并且柱子是否适用
3.流动相是否新鲜
4.样品是否稳定
赞一下 回复此楼
7楼2015-06-09 10:57:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

roid617

木虫 (著名写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by duliuhui at 2015-06-09 10:52:33
是不是色谱柱没有平衡好，继续观察看看吧。
还有以前做过吗，是以前正常现在头一次发生？还是头一次做这个实验发现的情况，需区别对待。
还有考虑是否温度等的影响，有时某些成分对环境温度也很敏感。多方面考虑一 ...

上周也出现这个情况 用的是另一根柱子 平衡了很久 而且一直等度洗脱 连续进了7针  每针30min
赞一下 回复此楼
8楼2015-06-09 11:15:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小小李飞刀

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
roid617: 金币+1 2015-06-09 13:49:15
流动相是混合的还是单相，
赞一下 回复此楼
好好努力
10楼2015-06-09 12:23:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 roid617 的主题更新
271/3返回列表123下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭