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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 新药研发 » 资料求助 » Agilent HPLC1260 每一针都比上一针出峰提前近一分钟
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luhh1549

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
roid617: 金币+2 2015-06-09 13:48:52
流动相没混匀，柱温不稳

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11楼2015-06-09 12:55:07
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roid617

木虫 (著名写手)
引用回帖:
10楼: Originally posted by 小小李飞刀 at 2015-06-09 12:23:59
流动相是混合的还是单相，

四元泵
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12楼2015-06-09 13:49:27
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XYGZ05

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

流动相按比例配好，单相进样试一下。
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13楼2015-06-09 14:08:47
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cqmqc

至尊木虫 (职业作家)

清水

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
之前是有气泡，随着气泡 排干净了就好了
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只要自己不放弃，没什么可以阻止你的脚步！
14楼2015-06-09 14:38:32
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archbishop

禁虫 (职业作家)

优秀版主
很像是没平衡好。可以去掉磷酸再试试。
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雲幕低垂映桂子，江月留白問柳心。
15楼2015-06-09 15:55:56
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lionguy

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
由液相比例阀控制的各个通道的流动相比例可能不准了。
液相比例阀的日常维护保养
1、不要在个通道内存放水，每次使用结束时，清洗完色谱柱之后，必须将通道内的水置换成甲醇；否则，一旦水中长菌，菌丝体会堵塞色谱柱，而且无法将其清洗出来。
2、不要在个通道内存放乙腈，每次使用结束时，清洗完色谱柱之后，必须将通道内的乙腈置换成甲醇；否则，乙腈在通道中长期存放，由于其对橡胶有溶胀作用，时间太久了就会导致比例阀的橡胶密封圈溶胀，从而导致比例阀输出的流动相比例不再准确了。
3、HPLC仪器每隔3个月，建议用70度的高纯热水一次高速冲洗各个通道，冲洗结束后再将各个通道中置换成甲醇。
    日常做好HPLC和色谱柱的养护，工作时仪器设备就不会出洋相。多年来，我用的仪器基本上不出问题，当然，正常的更换能量不足的紫外灯、以及滤芯等不算在内。
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16楼2015-06-10 10:30:18
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hr.wu

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
之前我碰到过类似问题，后来发现原因是比例阀出现问题，比如设定抽取B通道，但是在同时A通道的流动相也在进入系统，结果就是实际的流动相比例在不断改变，同样的对照品出峰一针比一针晚。建议你试验一下是否也有相同的问题。假如你是把有机相和水相混合后单通道进流动相，这时你把另外三个通道过滤头提起来，进去一小段空气，再放回去，看看在运行时三个气泡在管道中是否运动就知道了。
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17楼2015-06-10 10:58:54
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dcmyt

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
应该是每一针梯度完了之后的平衡时间不够吧~
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18楼2015-06-11 10:03:29
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fione_liu

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
应该就是流动相没有平衡好，你的流动相里面磷酸盐缓冲液含量比较高，不建议采用双通道，你可以考虑将流动相混合后单通道进行试验，这样的保留时间会比较有保障
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19楼2015-06-12 08:01:03
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王玉峰717

木虫 (正式写手)
温度对出峰时间也有影响，可以排查下柱温箱。

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走别人的路，让别人无路可走。
20楼2015-06-12 08:31:00
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