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roid617

木虫 (著名写手)

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[求助] Agilent HPLC1260 每一针都比上一针出峰提前近一分钟已有15人参与

如上：
      检测人参皂苷Rb1，中检所对照品，浓度0.4mg/ml，现配
   流动相：乙腈：0.1%磷酸水（32:68），检测波长203nm，柱温30℃。停止时间30min。
   如下图所示，对照品连续进样，每针没上一针提前近1min出峰，色谱柱是岛津的C18柱，更换过同种类的，效果一样。
液相应该没问题，之前同事测的其他成分出峰正常。难道是人参皂苷Rb1的原因？

ELR5ZTOH1S()]5307NP_ZW6.jpg

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1楼 2015-06-09 09:35:55

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lionguy

木虫 (著名写手)

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专业: 色谱分析

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1

由液相比例阀控制的各个通道的流动相比例可能不准了。
液相比例阀的日常维护保养
1、不要在个通道内存放水，每次使用结束时，清洗完色谱柱之后，必须将通道内的水置换成甲醇；否则，一旦水中长菌，菌丝体会堵塞色谱柱，而且无法将其清洗出来。
2、不要在个通道内存放乙腈，每次使用结束时，清洗完色谱柱之后，必须将通道内的乙腈置换成甲醇；否则，乙腈在通道中长期存放，由于其对橡胶有溶胀作用，时间太久了就会导致比例阀的橡胶密封圈溶胀，从而导致比例阀输出的流动相比例不再准确了。
3、HPLC仪器每隔3个月，建议用70度的高纯热水一次高速冲洗各个通道，冲洗结束后再将各个通道中置换成甲醇。
日常做好HPLC和色谱柱的养护，工作时仪器设备就不会出洋相。多年来，我用的仪器基本上不出问题，当然，正常的更换能量不足的紫外灯、以及滤芯等不算在内。