[求助] SDS-PAGE已有4人参与

» 猜你喜欢

三无产品还有机会吗已经有3人回复
投稿返修后收到这样的回复，还有希望吗已经有7人回复
压汞仪和BET测气凝胶孔隙率已经有4人回复
博士申请都是内定的吗？已经有14人回复
谈谈两天一夜的“延安行” 已经有13人回复
氨基封端PDMS和HDI反应快速固化已经有11人回复
之前让一硕士生水了7个发明专利，现在这7个获批发明专利的维护费可从哪儿支出哈？已经有11人回复
论文投稿求助已经有4人回复
Applied Surface Science 这个期刊。有哪位虫友投过的能把word模板发给我参考一下嘛已经有3人回复
投稿精细化工已经有6人回复

开心最重要

1楼2015-06-02 16:45:23

回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

恶魔的左眼

木虫 (正式写手)

应助: 110 (高中生)
金币: 2237.7
红花: 20
帖子: 425
在线: 880.6小时
虫号: 3705608
注册: 2015-03-03
专业: 蛋白质组学

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
pqq226: 金币+3, ★有帮助 2015-06-10 09:54:02

这个跑的还算可以的，通常胶跑到最后都或多或少都有些弯曲现象，不过，你的第7条带跑的很好啊，这个加的是什么样品？
以下是对蛋白表达的SDS-PAGE一些建议：
1. 电泳凝胶浓度选择不当。
2. 低于10Kd 的小分子蛋白质要用Tricine 胶。
3. 靠近前沿的电泳带分辨率不佳。根据分子量与凝胶孔径的关系，选择适当浓度的凝胶。
4. 蛋白质样品水解。注意除去蛋白质样品的内源性的水解酶，不要反复冻融。
5. 电泳时间过长或过短。溴酚蓝达到分离胶的底部即应该关闭电泳电源。
6. 缓冲溶液、SDS 都要新鲜配制。
7. 避免加样过多，提高分辨率。小体积样品可给出窄带，加样体积根据样品浓度和凝胶厚度灵活掌握。一般上样
体积为10-15uL（即2-10ug 蛋白质）。
8. 加热变性后的蛋白质样品要放置到室温即电泳，不要久放，因为蛋白质的二硫键在高温下可能是会断开，但是
暴露于空气中温度降低会重新形成二硫键，而且可能在过久放置过程中蛋白质可能会再折叠，更不要扔到冰箱
里保存。

赞一下(1人)

早上一副睡不醒的样子，下午一副没睡醒的样子，晚上一副打了鸡血的样子！

3楼2015-06-05 10:37:48

sunfl9091

银虫 (小有名气)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 472.7
散金: 550
红花: 3
帖子: 212
在线: 178.9小时
虫号: 677797
注册: 2008-12-19
性别: GG
专业: 细胞、亚细胞结构与功能

你这个是那家的产品呀

赞一下(1人)

4楼2015-06-05 13:57:55

普通回帖

mataomatao

禁虫 (正式写手)

感谢参与，应助指数 +1

本帖内容被屏蔽

2楼2015-06-03 20:00:35

hajierlove

铜虫 (正式写手)

应助: 44 (小学生)
金币: 197.8
散金: 130
红花: 15
沙发: 1
帖子: 427
在线: 175.7小时
虫号: 2346230
注册: 2013-03-14
性别: MM
专业: 生态学

【答案】应助回帖

感觉表达量很低呀

[ 发自小木虫客户端 ]

踏实

5楼2015-06-06 14:59:09

alexkinglk

银虫 (初入文坛)

应助: 1 (幼儿园)
金币: 394.5
散金: 20
红花: 2
帖子: 40
在线: 23小时
虫号: 676620
注册: 2008-12-17
性别: GG
专业: 水文地质学(含地热地质学)

跑的挺好的，smile是很正常的。

[ 发自小木虫客户端 ]

二手的科学家

6楼2015-06-06 16:34:25

pqq226

铜虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 148.1
帖子: 50
在线: 23.2小时
虫号: 3860032
注册: 2015-05-10
性别: MM
专业: 生物大分子结构与功能

引用回帖:

5楼: Originally posted by hajierlove at 2015-06-06 14:59:09
感觉表达量很低呀

很低的节奏，所以看不出结果如何

开心最重要

7楼2015-06-10 09:41:45

pqq226

铜虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 148.1
帖子: 50
在线: 23.2小时
虫号: 3860032
注册: 2015-05-10
性别: MM
专业: 生物大分子结构与功能

引用回帖:

3楼: Originally posted by 恶魔的左眼 at 2015-06-05 10:37:48
这个跑的还算可以的，通常胶跑到最后都或多或少都有些弯曲现象，不过，你的第7条带跑的很好啊，这个加的是什么样品？
以下是对蛋白表达的SDS-PAGE一些建议：
1. 电泳凝胶浓度选择不当。
2. 低于10Kd 的小分子蛋白 ...

非常感谢，发现好多问题我都出现了。。。

开心最重要

8楼2015-06-10 09:47:38