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小枯草

铜虫 (初入文坛)

[求助] 柱层析纯化蛋白图出了问题,峰顶端平的,大家能帮我看看吗 已有3人参与

柱层析法纯化蛋白,条件如下:
流速0.5ml/min,
0.5M氯化钠洗脱,
上样量1ml,
DEAE-纤维素-DE52纯化蛋白,
峰图如下,特丑,顶端是平的,试了好多次都是这样

柱层析纯化蛋白图出了问题,峰顶端平的,大家能帮我看看吗
无标题.png
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闲暇时光
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花雨渡飞仙

金虫 (正式写手)

你吸光度的的最大值是多少?
5楼2015-05-29 16:49:57
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永远的笑莲

铁虫 (初入文坛)

会不会是层析介质达到了最大载量的结果。
6楼2015-05-29 17:11:00
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calorimetry

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
小枯草: 金币+1 2015-06-01 17:09:11
这个峰使蛋白质峰吗?是不是穿透峰呀?

你把峰尖产物收集后做一下红外紫外和电泳检测一下,与标准品对照一些,如果没有标准品,直接对缝尖产物测定产物的生物活性。
9楼2015-06-01 13:52:00
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普通回帖

liuderong

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
会不会是你把软件的参数设置成只能显示这么大的数值了,把吸光度最大值的阀值调大一点试试看
2楼2015-05-29 10:12:00
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小枯草

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by liuderong at 2015-05-29 10:12:00
会不会是你把软件的参数设置成只能显示这么大的数值了,把吸光度最大值的阀值调大一点试试看

不是的,我调过大小了,没用,我在想是不是那个时间点下来的东西吸光值是一样的,分不开啊
闲暇时光
3楼2015-05-29 10:19:58
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afyb

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
感谢参与,应助指数 +1
小枯草: 金币+1, ★有帮助 2015-05-29 22:58:23
目的蛋白太多了,跑平了吧。减小上样量试试。
4楼2015-05-29 15:31:58
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小枯草

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 花雨渡飞仙 at 2015-05-29 16:49:57
你吸光度的的最大值是多少?

1339
闲暇时光
7楼2015-05-29 22:56:23
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小枯草

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 永远的笑莲 at 2015-05-29 17:11:00
会不会是层析介质达到了最大载量的结果。

你说的不太懂哎
闲暇时光
8楼2015-05-29 22:57:58
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小枯草

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
9楼: Originally posted by calorimetry at 2015-06-01 13:52:00
这个峰使蛋白质峰吗?是不是穿透峰呀?

你把峰尖产物收集后做一下红外紫外和电泳检测一下,与标准品对照一些,如果没有标准品,直接对缝尖产物测定产物的生物活性。

你好,谢谢回答,请问怎么检测生物活性
闲暇时光
10楼2015-06-01 17:08:28
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