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DNAstable(R) and DNAstable(R) LD 操作手册
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| DNAstable® and DNAstable® LD 操作手册 1、样品制备 ---适用于已纯化的DNA，任何形式的DNA均可在DNAstable保护下长期储存，包括基因组DNA、质粒、寡核苷酸、PCR产物、人工染色体和复杂样品混合DNA（例如法医取证DNA和基因鉴定DNA样品）。 a、绝大多数标准分子生物学技术市售试剂盒与DNAstable是完全兼容的；为得到最佳效果，DNA样品必须是已经纯化过的，无污染、不含活性DNA酶； b、在加入到 DNAstable（干式or管式）之前，纯化DNA应悬浮在水或者TE缓冲液（10nM Tris.Cl，1mM EDTA）； c、加入之前，同样应该确定DNA样品浓度；虽然没有必要，但是任然建议确立一个公式，以便以后的检索和应用； d、为得到最佳效果，每管（孔）DNA质量不应超过30ug，and 不超过50ul。针对寡核苷酸，我们建议每管（孔）20ul保存，浓度≤100μM per oligo（2nmol of each oligo）。 2、样品干燥和保存 --DNAstable 可以再室温下保护DNA活性。每个PE管或板孔都含有DNAstable（固定在底部，粉红色），可以保护皮克和微克级的DNA。DNAstable 是针对液体样本的应用，基质溶解并在包围样品表面形成保护层。then 样品需要完全干燥以便于在室温状态长期保护其活性稳定。 注意：如果后期要使用分光光度计来测量样品浓度，建议保留一个未使用的的DNAstable 管或者板孔 作为空白对照。 流程： a、确定样品种DNA数量（μg/ml），并计算出应加入到PE管或者板孔的体积； b、直接加入液体样品到PE管或者板孔； c、混匀，避免气泡产生 d、室温（15-25℃）干燥 建议最终体积不要超过50ul；大体积样品需要真空干燥以保证完全干燥，我们建议使用自然干燥（层流工作台）和真空离心干燥，所需时间见下面图片表格。 注意：干燥需要在室温下进行，长时间处于潮湿环境会降低产品性能和保护效果。实验室环境通常保持40-50%的相对湿度，如果超过了这一标准，我们建议您使用真空干燥装置。 e、室温储存干燥的样品、注意防潮。 完全干燥后的样品，需要用铝箔袋密封。PE管式的产品，盖子如果没有受损，也可以保证密封效果。 DNAstable对温度和湿度敏感，因此建议保存在室温干燥环境中，长期的暴露在光照环境可能会导致产品变色，但是不影响保护效果。避光可以防止产品变色。 液体DNAstable（DNAstable LD）使用说明 将20ulDNAstable LD加入到1-100ul DNA样品的水溶液或者缓冲液中（≤30μg）.上下颠倒PE管，以混匀，尽量避免产生气泡。干燥过程见上述。 3、样品复苏 流程： a、加入10-100ul体积的水或者缓冲液到干燥的样品管或者板孔中； 水和缓冲液的种类、体积，根据之前计算出来的DNA质量，和具体的下游应用来计算和选择； b、室温存放15min以便完全溶解； c、上下颠倒PE管，混匀样品，避免气泡； d、未使用的溶解后样品可以在4℃存放，或者室温存放10天。 未使用样品可以再次干燥并长期存放，不影响样品稳定性，但是建议溶解并重复干燥次数不要超过3次。 |
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