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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 蛋白上清表达无活性，求复性方法
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MarchZR

银虫 (小有名气)
很多人好像都不了解一个概念，就是，原核表达的蛋白，如果是上清中表达的话，活性应该是有的，不是包涵体，不需要复性，因为上清本身就是可溶的，哪来的包涵体。第二个，原核表达蛋白如果是在包涵体中有表达，那就要复性，但是就算是复性成功了，对于蛋白活性也是没有保证的，意思就是如果采用原核系统表达（如大肠杆菌)大家都想要上清中的蛋白，不想要包涵体的蛋白，就算是复性了活性也不及真核表达的蛋白，所以对于活性有要求的应该用真核表达蛋白
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11楼2015-12-16 17:41:44
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高亚楠六

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
11楼: Originally posted by MarchZR at 2015-12-16 17:41:44
很多人好像都不了解一个概念，就是，原核表达的蛋白，如果是上清中表达的话，活性应该是有的，不是包涵体，不需要复性，因为上清本身就是可溶的，哪来的包涵体。第二个，原核表达蛋白如果是在包涵体中有表达，那就要 ...

为什么我表达了一个蛋白，在上清中表达，却没有活性，蛋白含二硫键
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12楼2016-05-09 19:25:01
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raycupid

金虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by linden00 at 2015-05-26 17:11:09
但是上清无活性呀...

有些特殊情况确实需要如此，如果真的确认上清表达的蛋白没活性，就变性后尝试复性试试，比如需要二聚体时，就往往要用复性才能得到。

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13楼2017-02-26 11:26:47
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