| 查看: 1696 | 回复: 14 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
[交流]
求各位前辈帮帮忙吧，快疯了。。。 已有9人参与
|
|||
|
我做的是真菌基因组ＤＮＡ提取，做了好久，电泳才好歹有了个结果（图１最右边一个），ｍａｒｋｅｒ用的Ｄ２０００，也不知道这是不是ＤＮＡ。然后又做ＰＣＲ，就是做不出东西，ＰＣＲ的原材料都是去年老师买的，学姐用过的，据说什么都没做出来。 ＰＣＲ总体系为５０微，包括 10×扩增缓冲液 ５ul • dNTP混合物 １ul • 引物 （１００ｕＭ） 各２ul • 模板DNA １．５ul • Taq DNA聚合酶 （５Ｕ／ul） ０．４ul • ２５ｍＭ Mg2+ ３ul • 加双蒸水至 ５０ul 反应程序如下：９４℃ ３ｍｉｎ， ９４℃ １ｍｉｎ， 起始退火温度４８℃ １ｍｉｎ， ７２℃ ３ｍｉｎ， ３０个循环后７２℃ １０ｍｉｎ， 模板用的图１最右边的样品，引物是ＮＳ１和ＮＳ８，因为计算这两个引物ＴＭ值相差比较大，一个４９℃，一个５９℃，相差有１０度，所以每循环退火温度升高０．４℃（这是叫ｔｏｕｃｈ－ｄｏｗｎ ＰＣＲ吗？），结果就做出了图２的样子，全是引物二聚体了？ｍａｒｋｅｒ用的Ｄ２０００。 我只有六个金币，跪求各位前辈帮帮忙啊，小弟感激不尽！！！  图１.JPG  图２.jpg |
回复此楼» 本帖已获得的红花（最新10朵）
xueyuxx» 猜你喜欢
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有91人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
-
林科院林化所招收材料与化工专业硕士，坐标南京
已经有0人回复
-
留学--博士招生
已经有15人回复
-
化学工程，本211，求调剂，ab区不限
已经有4人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 快疯了，求大神过来指点一二。。。。
已经有5人回复
- 怎么缺陷提取图像中的缺陷部分？着急！请各位大神帮帮忙
已经有6人回复
- 有关IEEE Antennas and Wireless Propagation Letters 期刊投稿求助
已经有14人回复
- 最近被父母要求保研逼疯了。
已经有19人回复
- PLOS one 版面费求助！
已经有6人回复
- 求地理专业的前辈指导，选择专业问题
已经有30人回复
- 安装编译VASP出错 求各位前辈帮帮忙指点一下
已经有5人回复
- 求计算机类好中的SCI期刊
已经有11人回复
- 求教各位前辈，如何利用LOCPOT做求出真空能级？
已经有6人回复
- Mathematica关于绘制隐函数方程组的问题，跪求，快疯了
已经有11人回复
- 吸附类知识求助，感谢各位虫子帮帮忙
已经有10人回复
- 失重实验求助！！！各位高手帮帮忙！
已经有3人回复
- 求助分析红外光谱图，谢谢各位前辈了。
已经有8人回复
- 求助如何固定原子坐标进行优化，快搞疯了
已经有16人回复
- 凝胶注模中的引发问题，急急急，前辈们帮帮分析分析
已经有12人回复
- 考研报名中，纠结专业中，大家帮帮忙呀
已经有29人回复
- 我学的机电一体化，感觉就业很迷茫。
已经有24人回复
9楼2015-05-27 14:29:26
xueyuxx
木虫 (小有名气)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 3407.4
- 散金: 479
- 红花: 1
- 帖子: 144
- 在线: 150.4小时
- 虫号: 2378458
- 注册: 2013-03-26
- 性别: GG
- 专业: 金属材料的力学行为
2楼2015-05-25 22:16:24
3楼2015-05-26 00:26:41
4楼2015-05-26 08:41:17
