| 查看: 1542 | 回复: 1 | ||
rmbszla木虫 (小有名气)
|
[求助]
噬菌体滴度测定的一些问题 已有1人参与
|
|
现在在做噬菌体实验，用的是NEB购买的C7C的随机多肽库。但在测定滴度时，会出现10的8次方一层蓝色，10次方稀释的蓝斑较少，而12,14次方稀释蓝斑会比较多的现象，想咨询一下是什么原因呢？我该怎么解决？ 实验步骤主要是： 1. 取过夜培养的菌液 50 μL，加入 5 mL LB液体培养基中，37℃振荡培养至对数生长期（OD600≈0.5）。 2. 融化顶层琼脂，分装 3 mL/管，保温于45℃水浴备用。 3. 用LB培养基将洗脱（或扩增）后的噬菌体进行 10 倍系列稀释。每次稀释都换枪头的 4. 将 10 μL 稀释好的噬菌体加入到 200 μL 对数生长期的宿主菌液中，混匀，室温放置 5 min。 5. 将上述感染菌加入4 mL 顶层琼脂中，快速混匀，倾注于LB/IPTG/X-gal 平板上，37℃培养过夜。 |
回复此楼» 猜你喜欢
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
关于抗原抗体识别问题
已经有6人回复
- 请教噬菌体MS2样品的培养及测定方法
已经有8人回复
- 噬菌体分类问题
已经有10人回复
- 关于噬菌体随机肽库的一些问题，急求~
已经有13人回复
- 【求助/交流】噬菌体肽库淘选时滴度测定问题
已经有7人回复
- 【求助/交流】ELISA方法测量猪瘟病毒攻毒后抗体滴度的实验
已经有6人回复
- 【求助/交流】噬菌体展示肽库淘选
已经有15人回复
- 关于噬菌斑
已经有12人回复
★
rmbszla: 金币+1, ★有帮助 2015-09-24 13:47:09
rmbszla: 金币+1, ★有帮助 2015-09-24 13:47:09
|
本帖内容被屏蔽 |
2楼2015-09-22 19:37:34
