24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 1045  |  回复: 9
当前主题已经存档。
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

tcxuefeng

金虫 (正式写手)

[交流] 见鬼了,测序结果下游引物丢失?

条带大小1Kb左右.以菌液形式送去上海生工测序,要求测通.
今天测序结果电子版发过来.拼接后1300bp左右.上游引物序列完全匹配,但是下游引物序列(不论是酶切位点还是目的基因上的片段)都完全找不到.把下游反向互补,反向,互补,正向都比过了,一点影子都没有!难道见鬼了?

注:连接载体是pMD-19T Simple Vector.没有做蓝白斑,但是做过菌落PCR.之后划线分离后又作了一遍菌落PCR.验证阳性后送去的两管.其中一管没有测出来.
回复此楼

» 猜你喜欢

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tcxuefeng

金虫 (正式写手)

楼上的朋友谢谢你的回答,可单引物怎么扩增出目的条带?
最多是线性增加呀,30轮怎么也不可能电泳可见吧。
9楼2008-07-19 14:30:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答

donna181

金虫 (小有名气)

可能没有连上!

很正常,菌液PCR不准的,你提一下质粒做一下酶切吧!
2楼2008-07-18 16:04:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bingzheyu

银虫 (小有名气)

当时在测序之前确实有必要先进行酶切验证的,再者会不会是测序公司未给全部序列给你.
3楼2008-07-18 16:08:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tcxuefeng

金虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by donna181 at 2008-7-18 16:04:
很正常,菌液PCR不准的,你提一下质粒做一下酶切吧!

谢谢!
我做的是菌落PCR。我也知道会有假阳性。但问题是测序结果中在前面确实出现了我上游引物的约30的bp,完全吻合。而下游却莫名其妙丢失了。
如果没连上这个也太巧合了吧。
4楼2008-07-18 19:17:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 0856,材料与化工321分求调剂 +7 大馋小子 2026-03-27 8/400 2026-03-27 22:31 by 无际的草原
[考研] 277跪求调剂 +5 1915668 2026-03-27 8/400 2026-03-27 19:53 by WYUMater
[考研] 化学调剂 +4 爱吃番茄的旭 2026-03-24 5/250 2026-03-27 17:50 by kiokin
[考研] 材料与化工(0856)304求B区调剂 +7 邱gl 2026-03-27 7/350 2026-03-27 15:27 by Joe率
[考研] 339求调剂 +4 烤麦芽 2026-03-27 5/250 2026-03-27 13:23 by 752105528
[考研] 考研调剂 +10 呼呼?~+123456 2026-03-24 10/500 2026-03-27 11:46 by wangjy2002
[考研] 调剂 +3 李嘉图·S·路 2026-03-27 3/150 2026-03-27 11:19 by wangjy2002
[考研] 324求调剂 +5 hanamiko 2026-03-26 5/250 2026-03-27 10:33 by wangjy2002
[考研] 求调剂323材料与化工 +7 1124361 2026-03-24 7/350 2026-03-27 10:22 by wangjy2002
[考研] 304求调剂 +3 曼殊2266 2026-03-27 3/150 2026-03-27 10:17 by guoweigw
[考研] 284求调剂 +11 junqihahaha 2026-03-26 12/600 2026-03-27 04:37 by wxiongid
[考研] 一志愿北化求调剂 +3 Jsman 2026-03-22 3/150 2026-03-26 21:06 by ajpv风雷
[考研] 321求调剂 +6 Ymlll 2026-03-24 6/300 2026-03-26 20:50 by 不吃魚的貓
[考研] 081200-11408-276学硕求调剂 +3 崔wj 2026-03-26 3/150 2026-03-26 19:57 by nihaoar
[考研] 生物学 296 求调剂 +4 朵朵- 2026-03-26 6/300 2026-03-26 19:01 by 不吃魚的貓
[考研] 生物学学硕,一志愿湖南大学,初试成绩338 +4 YYYYYNNNNN 2026-03-26 4/200 2026-03-26 19:00 by macy2011
[考研] 311求调剂 +3 冬十三 2026-03-24 3/150 2026-03-24 21:31 by peike
[考研] 080500求调剂 +3 zzzzfan 2026-03-24 3/150 2026-03-24 16:38 by barlinike
[基金申请] 请教下大家 2026年国家基金申请是双盲审吗? +3 lishucheng1 2026-03-22 5/250 2026-03-24 08:22 by gltch
[考研] 一志愿070300浙大化学358分,求调剂! +4 酥酥鱼.. 2026-03-21 4/200 2026-03-23 08:12 by Iveryant
信息提示
请填处理意见