应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 实验结果太奇怪了
52/1返回列表
查看: 1586  |  回复: 14
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

1029016431

银虫 (小有名气)

[求助] 实验结果太奇怪了 已有4人参与

做的是一种植物的全长cDNA文库，文库建好后挑单克隆拿去测序，测序结果既不是插入片段序列，也不是质粒载体序列，确实大肠杆菌序列！邪门！哪位专业人士能给个合理解释吗？不胜感激！
回复此楼

» 猜你喜欢
势必一飞
1楼 2015-05-19 20:03:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

1029016431

银虫 (小有名气)
引用回帖:
13楼: Originally posted by erland21411 at 2015-05-23 22:14:39
楼主你这个库做的时候有污染吧……或者，你的cDNA是打断了存在大肠杆菌里的？类似BAC文库那种，做的不好有宿主污染，测序的时候就有可能会测到宿主的序列……

嗯  我也猜测有这种可能。

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
势必一飞
14楼2015-05-23 22:28:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 15 个回答

普鲁旺斯花季

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2015-05-20 09:00:43
应该是你的载体也没有转进大肠杆菌中，长的只是细菌，如果是抗性筛选的话，那可能是出现了耐受菌或者污染了
赞一下(1人) 回复此楼
一生转而得一夏，当司掌好年华
2楼2015-05-19 23:40:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

1029016431

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 普鲁旺斯花季 at 2015-05-19 23:40:55
应该是你的载体也没有转进大肠杆菌中，长的只是细菌，如果是抗性筛选的话，那可能是出现了耐受菌或者污染了

质粒载体有氯霉素抗性，请问倘若是被抗性株污染的话，在什么时候污染的才会把原来的插入片段序列掩盖呢？抗性株的数量在转化是应该还远没有非抗性株和插入片段多吧

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
势必一飞
3楼2015-05-20 08:21:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yhz0626

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
质粒空载，但抗生素并没有筛选除去，假阳性，可以再加上蓝白斑筛选

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
4楼2015-05-20 23:33:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 15 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 国社科又开始会评了，不知道这次命运如何 +7 雨打竹帘 2026-08-30 11/550 2026-08-31 23:16 by hittle2008
[考研] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 EZ67DG6CvcKL 2026-08-31 3/150 2026-08-31 22:12 by o3EMxHUAQDtS
[基金申请] 哪位高人中了，把查询到的截图贴出来让我看看，让我长长见识 +6 yuleib84 2026-08-26 7/350 2026-08-31 19:46 by 鱼翔浅底1
[基金申请] 能否申诉？ +7 echo8914667 2026-08-30 8/400 2026-08-31 17:00 by yihongxu
[文学芳草园] 梦想 +5 myrtle 2026-08-26 5/250 2026-08-31 14:40 by hahaboy
[基金申请] 29号明天会评吗 +4 笨笨唐 2026-08-28 4/200 2026-08-31 09:30 by huixian257
[考博] 找导师 +6 yuanjiabao 2026-08-29 7/350 2026-08-30 14:40 by 生科新手
[基金申请] 麻烦专家们看看评委们的意见（F口面上） +6 gdd2018 2026-08-28 11/550 2026-08-30 08:58 by 超级无敌华子
[基金申请] 国自然评审意见 +13 wangmingqi 2026-08-28 19/950 2026-08-29 10:22 by Poppy1104
[基金申请] 2026年叶企孙基金 +4 bud_bud 2026-08-27 7/350 2026-08-29 07:23 by foolishmani
[基金申请] 为什么资助数各大高校都创新高，自己申请怎么就这么难 +12 Kittylucky 2026-08-27 13/650 2026-08-29 00:04 by superceng
[基金申请] 系统查不到 +11 董八千 2026-08-26 11/550 2026-08-28 18:06 by Leogzhya
[基金申请] 怎么查啊 +6 huang1991js 2026-08-26 6/300 2026-08-28 08:42 by winsaint
[基金申请] 看板上这么多中的，有点像50人群里49个人都是骗子的那种感觉…… +5 a089 2026-08-26 6/300 2026-08-27 14:05 by jonewore
[基金申请] 怎么看青基中了没有啊 +5 叶九微 2026-08-26 5/250 2026-08-27 10:35 by l_zh2008
[基金申请] 我不理解！ +15 Edward_pc 2026-08-26 23/1150 2026-08-26 20:34 by zzuzxg
[基金申请] 出来了 +9 trojank 2026-08-26 9/450 2026-08-26 14:25 by 宝贝虫子
[基金申请] 为什么国自然不能直接公布 +4 bjdxyxy 2026-08-26 4/200 2026-08-26 13:12 by qingmu1201
[基金申请] 国合里面能看到了 +7 一怀馨秋 2026-08-26 7/350 2026-08-26 11:23 by zhaosm1982
[基金申请] 在坚冰还盖着北海的时候，我看到了怒放的梅花。 (金币+10) +6 ziyangfang 2026-08-25 9/450 2026-08-25 20:26 by huagongfeihu
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭