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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 光谱分析 » 圆二色光谱变温图谱分析
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tianyebarton

金虫 (初入文坛)

[求助] 圆二色光谱变温图谱分析 已有2人参与

在特征负峰220nm处，给目的蛋白做了个圆二色光谱的变温曲线。变温结果曲线的前半段走势比较合理，但是后半段走势并没有平缓下来，而是又快速升上去了，比较费解。把重复两次后的结果叠加起来发现类似。求予以指点为何变温曲线的后半段出现了这样奇怪的走势，跪谢！
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    • 2015-05-18 17:45:45, 70.26 K

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1楼 2015-05-18 17:44:06
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漫天飞银针

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

使用的溶剂是什么，是溶剂高温挥发的缘故吗
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2楼2015-09-01 13:03:15
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匿名

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3楼2015-09-09 15:02:42
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tianyebarton

金虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 漫天飞银针 at 2015-09-01 13:03:15
使用的溶剂是什么，是溶剂高温挥发的缘故吗

是纯水，可能含有很低浓度的Tris（因为本身蛋白在0.1M Tris溶液中，但是用纯水过了两遍柱子，溶液中的Tris浓度应该很低了）。

后面做的实验结果好很多了，可能是CD中升温有点快，后面的阶段没有热平衡，测出来的结果有些误差。谢谢了
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4楼2015-09-10 16:52:11
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tianyebarton

金虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by aaaylm at 2015-09-09 15:02:42
我觉得可以只做几个温度点CD的看看是不是和你连续做的曲线能对应上。
比如变性前温度、变性时温度和变性后温度。
这样就能看出做的图是真的“奇怪”还是正常，进一步就可以分析原因了

后面做的实验结果好很多了，可能是CD中升温有点快，后面的阶段没有热平衡。
更改实验后每升温一度测一次，等两分钟热平衡后再升温，结果好很多了。谢谢
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5楼2015-09-10 16:53:39
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匿名

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6楼2017-07-24 13:43:16
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yeyiyiyi

新虫 (初入文坛)
求助，请教一下测完是怎么算Tm值的呀，找了好多文献都不是很清楚
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7楼2022-02-20 22:43:09
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