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tianyebarton

金虫 (初入文坛)

[求助] 圆二色光谱变温图谱分析已有2人参与

在特征负峰220nm处,给目的蛋白做了个圆二色光谱的变温曲线。变温结果曲线的前半段走势比较合理,但是后半段走势并没有平缓下来,而是又快速升上去了,比较费解。把重复两次后的结果叠加起来发现类似。求予以指点为何变温曲线的后半段出现了这样奇怪的走势,跪谢!
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漫天飞银针

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

使用的溶剂是什么,是溶剂高温挥发的缘故吗
2楼2015-09-01 13:03:15
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匿名

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3楼2015-09-09 15:02:42
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tianyebarton

金虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 漫天飞银针 at 2015-09-01 13:03:15
使用的溶剂是什么,是溶剂高温挥发的缘故吗

是纯水,可能含有很低浓度的Tris(因为本身蛋白在0.1M Tris溶液中,但是用纯水过了两遍柱子,溶液中的Tris浓度应该很低了)。

后面做的实验结果好很多了,可能是CD中升温有点快,后面的阶段没有热平衡,测出来的结果有些误差。谢谢了
4楼2015-09-10 16:52:11
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tianyebarton

金虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by aaaylm at 2015-09-09 15:02:42
我觉得可以只做几个温度点CD的看看是不是和你连续做的曲线能对应上。
比如变性前温度、变性时温度和变性后温度。
这样就能看出做的图是真的“奇怪”还是正常,进一步就可以分析原因了

后面做的实验结果好很多了,可能是CD中升温有点快,后面的阶段没有热平衡。
更改实验后每升温一度测一次,等两分钟热平衡后再升温,结果好很多了。谢谢
5楼2015-09-10 16:53:39
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匿名

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6楼2017-07-24 13:43:16
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yeyiyiyi

新虫 (初入文坛)

求助,请教一下测完是怎么算Tm值的呀,找了好多文献都不是很清楚
7楼2022-02-20 22:43:09
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