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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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lwk5716

铁杆木虫 (正式写手)

[交流] 关于实验中可变剪切的一些问题 已有1人参与

各位前辈:我在帮师姐做实验的过程中,遇到了一个问题。在扩增一个基因之后(用cDNA扩增),电泳发现只有一条带,切胶回收后连接T载体,挑菌测序,发现有些片段少了一个内含子,做了几次,挑菌7,8个会有一个,有时候少的内含子还不一样。但是,扩增后跑1%或2%琼脂糖胶只能看到一条带,可变的那条带比目的大小少100多bp,但是胶上就看不到那条带,这是怎么回事啊?在可变的内含子上设计引物倒是能扩出可变的那条带,只是全长就看不到了,是不是可变的比例占得小啊?
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luwei13566

木虫 (正式写手)

★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
lwk5716: 金币+5 2015-05-18 19:18:19
引用回帖:
10楼: Originally posted by lwk5716 at 2015-05-18 12:59:54
以后想看一下,这种较少的可变剪切对植物的作用是什么,在研究小麦抗旱中找到的。
...

如果想在这里探究一下那就得用干旱胁迫一下小麦看剪切部分的表达量差异了~~如果有所关联可以写一篇小论文了。不错~
大家相互帮助哈
11楼2015-05-18 13:55:10
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阿Q~~

至尊木虫 (文坛精英)

路过的看了一下,帮顶,祝福你好运!~~~~~~~~~~~~~~~~~~
自强不息,厚德载物;独立精神,自由思想。
3楼2015-05-17 09:38:12
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781055707

木虫 (著名写手)

★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
lwk5716: 金币+5, 谢谢你的回答! 2015-05-17 21:19:26
只要全部条带都得到了,可以考虑做个重叠pcr把要的连起来。

[ 发自小木虫客户端 ]
采菊东篱下,悠然见南山。
4楼2015-05-17 17:43:38
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xiaochong8693

木虫之王 (文坛精英)

哈哈~飘过~留下满满的祝福
祝福楼主 一切顺利
6楼2015-05-17 18:30:32
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