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yydr

新虫 (初入文坛)

[求助] TA克隆问题 已有3人参与

为什么我回收的片段没有杂带,最后连上载体以后跑胶看不是空载,用pcr扩增目的片段却不是我的目的片段大小呢?

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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yydr

新虫 (初入文坛)

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引用回帖:
2楼: Originally posted by cuihao102 at 2015-05-16 19:14:49
挑了几个转化子?是不是在电泳或者回收时污染了其它含有A尾巴的DNA片段了?

可是我跑胶回收后条带很单一啊

[ 发自小木虫客户端 ]
3楼2015-05-16 21:29:11
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cuihao102

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
挑了几个转化子?是不是在电泳或者回收时污染了其它含有A尾巴的DNA片段了?

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2楼2015-05-16 19:14:49
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cuihao102

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-05-18 23:08:02
引用回帖:
3楼: Originally posted by yydr at 2015-05-16 21:29:11
可是我跑胶回收后条带很单一啊
...

所谓污染不一定达到能看见的量,如果运气比较差的话只有一点其它DNA就有可能给连上了,就被你挑到了!所以推荐你多挑些转化子去验一下!

[ 发自小木虫客户端 ]

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4楼2015-05-16 21:46:46
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xiaocai611

新虫 (初入文坛)

差了多少?你可以把克隆菌拿去把目的片分段测序下
5楼2015-05-16 22:13:07
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