应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » TA克隆问题
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
111/2返回列表12下一页
查看: 1528  |  回复: 10
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

yydr

新虫 (初入文坛)

[求助] TA克隆问题 已有3人参与

为什么我回收的片段没有杂带，最后连上载体以后跑胶看不是空载，用pcr扩增目的片段却不是我的目的片段大小呢？

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2015-05-16 17:00:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cuihao102

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
挑了几个转化子？是不是在电泳或者回收时污染了其它含有A尾巴的DNA片段了？
赞一下 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

yydr
2楼2015-05-16 19:14:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yydr

新虫 (初入文坛)
送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by cuihao102 at 2015-05-16 19:14:49
挑了几个转化子？是不是在电泳或者回收时污染了其它含有A尾巴的DNA片段了？

可是我跑胶回收后条带很单一啊

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
3楼2015-05-16 21:29:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cuihao102

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-05-18 23:08:02
引用回帖:
3楼: Originally posted by yydr at 2015-05-16 21:29:11
可是我跑胶回收后条带很单一啊
...

所谓污染不一定达到能看见的量，如果运气比较差的话只有一点其它DNA就有可能给连上了，就被你挑到了！所以推荐你多挑些转化子去验一下！

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

yydr
4楼2015-05-16 21:46:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiaocai611

新虫 (初入文坛)
差了多少？你可以把克隆菌拿去把目的片分段测序下
赞一下 回复此楼
5楼2015-05-16 22:13:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yydr

新虫 (初入文坛)
送红花一朵
引用回帖:
4楼: Originally posted by cuihao102 at 2015-05-16 21:46:46
所谓污染不一定达到能看见的量，如果运气比较差的话只有一点其它DNA就有可能给连上了，就被你挑到了！所以推荐你多挑些转化子去验一下！
...

我把转化子都挑了，其他都是空载，只有这个是连上的，大小还不对……这运气是要有多差

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
6楼2015-05-16 23:38:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yydr

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by xiaocai611 at 2015-05-16 22:13:07
差了多少？你可以把克隆菌拿去把目的片分段测序下

目的1.2，扩出来的750到1k间，

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
7楼2015-05-16 23:39:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

daniel1112

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-05-18 23:08:26
你是用通用引物还是特异引物跑的菌液pcr，若是通用引物的话建议用特异引物扩增，要是还有带的话只有测序检测了，有长度多态性的现象。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
赞一下 回复此楼
8楼2015-05-16 23:39:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yydr

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
8楼: Originally posted by daniel1112 at 2015-05-16 23:39:47
你是用通用引物还是特异引物跑的菌液pcr，若是通用引物的话建议用特异引物扩增，要是还有带的话只有测序检测了，有长度多态性的现象。

我是用的自己的特异引物扩的，扩了两次都一样

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
9楼2015-05-17 00:19:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cuihao102

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
6楼: Originally posted by yydr at 2015-05-16 23:38:06
我把转化子都挑了，其他都是空载，只有这个是连上的，大小还不对……这运气是要有多差
...

如果你只是想做个克隆，那就别纠结这个了，调整一下连接体系重新连接转化吧！另外你挑了那么多，除了这个都是自连可能你的提载体质量是不是不太好啊？

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
10楼2015-05-17 09:15:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 yydr 的主题更新
111/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 319求调剂（接受跨专业调剂） +3 星星不眨眼喽 2026-04-03 4/200 2026-04-03 21:40 by liucky
[考研] 材料专硕322分 +13 哈哈哈吼吼吼哈 2026-04-01 13/650 2026-04-03 16:08 by 哦哦123
[考研] 293求调剂 +5 末未mm 2026-04-02 6/300 2026-04-03 15:20 by 王保杰33
[考研] 085404总分289，求调剂 +3 Acesczlo 2026-03-29 3/150 2026-04-03 14:41 by 氮气气气
[考研] 085600，材料与化工321分求调剂 +12 大馋小子 2026-03-28 12/600 2026-04-03 14:16 by 百灵童888
[考研] 工科 267求调剂 +5 wanwan00 2026-04-02 7/350 2026-04-03 14:14 by zhangdingwa
[考研] 求材料调剂 一志愿南昌大学 328分 +5 yyy..... 2026-04-03 5/250 2026-04-03 13:46 by 百灵童888
[考研] 295求调剂 +7 愿旅途永远坦然 2026-04-02 7/350 2026-04-03 08:22 by fangshan711
[考研] 调剂 +3 osbbx 2026-04-02 3/150 2026-04-03 07:47 by cc8418
[考研] 化学070300-总分378-求调剂 +5 挪椅子的泡泡糖 2026-04-02 5/250 2026-04-02 22:20 by ZXlzxl0425
[考研] 085600，320分求调剂 +6 大馋小子 2026-04-02 6/300 2026-04-02 21:54 by dongzh2009
[考研] 322求调剂：一志愿湖南大学 材料与化工（085600），已过六级。 +12 XX小邓 2026-03-29 13/650 2026-04-02 21:39 by 百灵童888
[考研] 一志愿北京科技材料科学与工程288分，求调剂 +14 是辰啊 2026-04-02 14/700 2026-04-02 21:10 by dongzh2009
[考研] 能源动力 调剂 +3 不破不立0 2026-04-02 3/150 2026-04-02 12:46 by ffffjjjj
[考研] 一志愿北交大材料工程，总分358 +4 cs0106 2026-04-01 4/200 2026-04-02 07:42 by 尚水阁主
[考研] 311求调剂 +10 李芷新1 2026-03-31 10/500 2026-04-01 14:38 by chenqifeng666
[考研] 求调剂 +4 DADA怪 2026-03-31 4/200 2026-04-01 14:30 by ZXlzxl0425
[考研] 材料调剂 +10 Eujd1 2026-03-31 11/550 2026-04-01 11:23 by ivanqyq
[考研] 哈尔滨工业大学材料与化工专硕378求调剂 +3 塔比乌斯 2026-03-30 3/150 2026-03-30 22:55 by 无际的草原
[考研] 求调剂 +7 青春裁为三截 2026-03-29 7/350 2026-03-30 13:14 by laoshidan
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭