24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 2659  |  回复: 4

永峰1230

铜虫 (小有名气)

[求助] 做WB,用DAB显色,显色时有印迹,膜干了就没了 已有2人参与

做WB, 使用DAB显色:   2ml甲醇溶解 6mg 4-CN, 2mg DAB,  10ul  30% 双氧水,  加PBS补至10ml。    显色后,几分钟 出现条带,因为我的蛋白含量少。 条带看着比较淡,,有过了几分钟,条带还是那么淡,而且 整个膜,开始背景色加深。。 因此,终止显色。。  加水,洗了洗膜。。  还是有条带的,比较淡。。  把膜放在37℃ 培养箱里,烘干。。  烘干之后,就没有条带了。。。。   再让入水里,又显现出条带,还是那么淡,,但是这样不能拍照。。。。不能拿出去给人看。。这个怎么回事呢???

改怎么改进呢?

下面是图片,用手机拍的可能不清晰,,改了一下色阶,能看到条带

做WB,用DAB显色,显色时有印迹,膜干了就没了
手机拍照.jpg


做WB,用DAB显色,显色时有印迹,膜干了就没了-1
原图调了色阶.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢

12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

luwei13566

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
主要问题可能还是你的蛋白太少了,尝试用超滤管一类的做个浓缩吧,以不浓缩的蛋白作为阴性对照~

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

大家相互帮助哈
2楼2015-05-16 00:27:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

永峰1230

铜虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by luwei13566 at 2015-05-16 00:27:14
主要问题可能还是你的蛋白太少了,尝试用超滤管一类的做个浓缩吧,以不浓缩的蛋白作为阴性对照~

嗯嗯。。好的。。过两天我再试一试。这两天没有再做

[ 发自小木虫客户端 ]
12
3楼2015-05-18 20:18:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

永峰1230

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 永峰1230 at 2015-05-18 20:18:32
嗯嗯。。好的。。过两天我再试一试。这两天没有再做
...

又做了一次。。蛋白浓度可以。。显色后也有。。当时是晚上,第二天颜色变淡很多。。到下午就基本上看不到了…………

[ 发自小木虫客户端 ]
12
4楼2015-05-23 22:24:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shilohbaby

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

我也是用的DAB显色,显色完成后,立马用纸将膜擦干,然后放到扫描仪上采集图像。采集完图像,把膜放到PE手套里保存,但是过几天去看,基本上没有显色了。可见DAB显色室温干燥的条件下不能长期保存,要及时保存图像。
5楼2016-01-06 10:11:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 永峰1230 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 085701环境工程求调剂 +8 多久上课 2026-03-27 8/400 2026-03-27 22:21 by 无际的草原
[有机交流] 高温高压反应求助 10+4 chibby 2026-03-25 4/200 2026-03-27 21:08 by BT20230424
[考研] 308求调剂 +7 墨墨漠 2026-03-25 7/350 2026-03-27 14:47 by 狂炫麦当当
[考研] 317求调剂 +5 十闲wx 2026-03-24 5/250 2026-03-27 13:48 by 杨杨杨紫
[考研] 303求调剂 +7 安忆灵 2026-03-22 8/400 2026-03-27 11:46 by sanrepian
[考研] 0703化学一志愿南京师范大学303求调剂 +3 zzffylgg 2026-03-24 3/150 2026-03-27 10:42 by shangxh
[考研] 324求调剂 +5 hanamiko 2026-03-26 5/250 2026-03-27 10:33 by wangjy2002
[考研] 286求调剂 +4 lim0922 2026-03-26 4/200 2026-03-27 10:28 by guoweigw
[硕博家园] 北京林业大学硕导招生广告 +6 kongweilin 2026-03-26 8/400 2026-03-27 10:18 by FF_16
[考研] 求调剂 +5 芦lty 2026-03-25 6/300 2026-03-26 20:49 by 不吃魚的貓
[考研] 321求调剂 +5 材料cailiao 2026-03-21 5/250 2026-03-26 20:41 by fmesaito
[考研] 352求调剂 +4 大米饭! 2026-03-22 4/200 2026-03-26 16:40 by 不吃魚的貓
[考研] 总分293求调剂 +6 加一一九 2026-03-25 8/400 2026-03-26 13:30 by yujianx
[考研] 寻找调剂 +5 倔强芒? 2026-03-21 8/400 2026-03-26 13:25 by 0906ljy
[考研] 07化学303求调剂 +5 睿08 2026-03-25 5/250 2026-03-25 22:46 by 418490947
[考研] 一志愿南航材料专317分求调剂 +5 炸呀炸呀炸薯条 2026-03-23 5/250 2026-03-24 16:52 by 星空星月
[考研] 269求调剂 +4 我想读研11 2026-03-23 4/200 2026-03-23 21:25 by pswait
[考研] 求调剂一志愿海大,0703化学学硕304分,有大创项目,四级已过 +6 幸运哩哩 2026-03-22 10/500 2026-03-22 20:10 by edmund7
[考研] 求调剂 +5 Zhangbod 2026-03-21 7/350 2026-03-22 13:13 by Zhangbod
[考研] 一志愿南大,0703化学,分数336,求调剂 +3 收到VS 2026-03-21 3/150 2026-03-21 18:42 by 学员8dgXkO
信息提示
请填处理意见