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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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永峰1230

铜虫 (小有名气)

[求助] 做WB，用DAB显色，显色时有印迹，膜干了就没了 已有2人参与

做WB， 使用DAB显色：   2ml甲醇溶解 6mg 4-CN, 2mg DAB,  10ul  30% 双氧水，  加PBS补至10ml。    显色后，几分钟 出现条带，因为我的蛋白含量少。 条带看着比较淡，，有过了几分钟，条带还是那么淡，而且 整个膜，开始背景色加深。。 因此，终止显色。。  加水，洗了洗膜。。  还是有条带的，比较淡。。  把膜放在37℃ 培养箱里，烘干。。  烘干之后，就没有条带了。。。。   再让入水里，又显现出条带，还是那么淡，，但是这样不能拍照。。。。不能拿出去给人看。。这个怎么回事呢？？？

改怎么改进呢？

下面是图片，用手机拍的可能不清晰，，改了一下色阶，能看到条带

做WB，用DAB显色，显色时有印迹，膜干了就没了
手机拍照.jpg


做WB，用DAB显色，显色时有印迹，膜干了就没了-1
原图调了色阶.jpg
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1楼 2015-05-15 19:59:07
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luwei13566

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
主要问题可能还是你的蛋白太少了，尝试用超滤管一类的做个浓缩吧，以不浓缩的蛋白作为阴性对照~
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永峰1230
大家相互帮助哈
2楼2015-05-16 00:27:14
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永峰1230

铜虫 (小有名气)
送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by luwei13566 at 2015-05-16 00:27:14
主要问题可能还是你的蛋白太少了，尝试用超滤管一类的做个浓缩吧，以不浓缩的蛋白作为阴性对照~

嗯嗯。。好的。。过两天我再试一试。这两天没有再做

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12
3楼2015-05-18 20:18:32
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永峰1230

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 永峰1230 at 2015-05-18 20:18:32
嗯嗯。。好的。。过两天我再试一试。这两天没有再做
...

又做了一次。。蛋白浓度可以。。显色后也有。。当时是晚上，第二天颜色变淡很多。。到下午就基本上看不到了…………

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12
4楼2015-05-23 22:24:33
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shilohbaby

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

我也是用的DAB显色，显色完成后，立马用纸将膜擦干，然后放到扫描仪上采集图像。采集完图像，把膜放到PE手套里保存，但是过几天去看，基本上没有显色了。可见DAB显色室温干燥的条件下不能长期保存，要及时保存图像。
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5楼2016-01-06 10:11:00
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