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不倒翁X

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[求助] 油脂TBA测定方法,丙二醛计算公式

⒊ 操作步骤:
⑴标准曲线的绘制
准确吸取每相当于丙二醛10ug的标准溶液0.0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6ml置于纳氏比色管中,加水至总体积为5ml,加入5mlTBA溶液,然后按样品测定步骤进行,测得光密度绘制标准曲线。
⑵样品测定:
准确称取融化均匀的油脂样品5-10g,置于100ml有盖三角瓶内,加入25ml三氯乙酸混合液,振摇半小时(保持油脂融溶状态,如冷结即在70℃水浴上略微加热使之融化后继续振摇)用双层滤纸过滤,除去油脂。滤液重复用双层滤纸过滤一次。
准确移取上述滤液5ml置于25ml比色管内,加入5mlTBA溶液,混匀,加塞,置于90℃水浴内保温40min,取出,冷却1h,移入小试管内,离心5min,上清液倾入25ml纳氏比色管中,加入5ml氯仿,摇匀,静置,分层,吸出上清液于532nm波长比色,对照标准曲线得到微克数(同时做空白试验)。
⒋ 计算
丙二醛含量(mg/kg)=C * 20/(5 * M)
式中:C——从标准曲线查得丙二醛的微克数(ug)
      M——样品质量(g)
光密度:TBA(A532/kg)=1000 * A532 *(V1+V2)* V/(M * V1)
式中:V——油脂用三氯乙酸定容体积,ml
     V1——取滤液体积,ml

     V2——加TBA体积,ml
如上,1.丙二醛含量计算公式的含义?
      2.为啥要求光密度?
      3.必须要用比色管吗?
      4.不离心,静置一会是否可行?
求好心人答疑解惑,非常感谢
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