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小宾SKY

新虫 (初入文坛)

[求助] 做水中总氮标准曲线时遇到的几个问题,望各位帮忙解决,谢谢 已有6人参与

本人在实验室做总氮曲线时,得到的数据如下:
稀释20倍                 0             1          2           3              4            5              6              7
波长=220 nm:      0.241       0.204    0.229    0.279   0.251       0.238       0.229      0.232
波长=275nm:    0.004        0.002    0.005    0.003   0.002       0.003       0.003      0.002
稀释8倍
波长=220nm:    0.594        0.558    0.536    0.717   0.608       0.596       0.619      0.621
波长=275nm:    0.001        0.002    0.004    0.008   0.004       0.006       0.002      0.004
试剂:  
1. 碱性过硫酸钾溶液:40g K2S2O8+15NaOH →溶于无氨水中→稀释至 1000ml定容即可。溶液放在聚乙烯瓶内,可贮存一周。
2. 1+9盐酸  
3.硝酸钾标准溶液:  (1)硝酸钾标贮备液:0.7218g以烘干4小时(105~110℃)硝酸钾溶于无氨水中,定容至1000ml,加入2ml三氯甲烷作为保护剂,可至少可稳定6个月。此溶液含硝酸盐氮100ug/ml。  (2)硝酸钾标准使用液:将贮备液稀释10倍即可。此溶液含硝酸盐氮10ug/ml。  
实验步骤
标准曲线的绘制
1.分别吸取0、0.5、1.00、2.00、3.00、5.00、7.00、8.00ml的硝酸钾标准使用溶液于25ml比色管中,用无氨水稀释至10ml标线。
2.加入5ml碱性过硫酸钾溶液,塞紧磨口塞,用纱布及纱绳裹紧管塞,以防蹦出。  
3.比色管置于压力蒸汽消毒器中,加热0.5h,放气使压力指针回零。然后升温至120~124℃开始计时。            
4.自然冷却,开阀放气,移去外盖。取出比色管并冷却至室温。  
5.加入1+9盐酸1ml,用无氨水稀释至25ml标线。  
6.在紫外分光光度计上,以新鲜无氨水作参比,用10mm石英比色皿分别在220nm及275nm波长处测定吸光度。用校正的吸光度绘制标准曲线。
操作过程完全严格按照要求,试剂的配制也是在尽量精准的情况下完成的。
不清楚 问题出在哪里?希望能有了解这一方面的能人帮忙解疑。非常感谢。
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kingsibing

新虫 (初入文坛)


小宾SKY(vaughn代发): 金币+1, 介绍自己的实践经验 2015-05-17 11:30:40
我就用国内的试剂做的空白值也很低。
4楼2015-05-16 22:10:49
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zhuzhu101

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
灿灿妹: 金币+1, 积极交流,鼓励新虫 2015-05-15 19:21:16
问题出在过硫酸钾上了,药品纯度不够。我刚做这个实验时也是如此。换了药品厂家后就好了,建议采用优耐德的过硫酸钾。效果就好了。
2楼2015-05-15 15:29:17
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碧落鱼池

铁杆木虫 (正式写手)

海盗

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
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小宾SKY(vaughn代发): 金币+1, 积极讲述经验 2015-05-17 11:30:26
小宾SKY: 金币+4, ★★★很有帮助 2015-05-18 14:53:02
氧化剂过硫酸钾的问题。请不要使用国产过硫酸钾,优级纯的纯度仍然不够,含N量高。推荐使用德国默克的过硫酸钾,国内外很多总氮在线监测仪表都用默克的。
3楼2015-05-16 11:08:07
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qixuanzhen

禁虫 (小有名气)

感谢参与,应助指数 +1
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5楼2015-05-17 12:48:09
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