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小宾SKY

新虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 40.5
帖子: 13
在线: 2.6小时
虫号: 3824525
注册: 2015-04-21
专业: 样品前处理方法与技术

[求助] 做水中总氮标准曲线时遇到的几个问题，望各位帮忙解决，谢谢已有6人参与

本人在实验室做总氮曲线时，得到的数据如下：
稀释20倍                0          1       2          3             4          5             6             7
波长=220 nm:    0.241    0.204 0.229 0.279 0.251    0.238    0.229    0.232
波长=275nm： 0.004       0.002 0.005 0.003 0.002    0.003    0.003    0.002
稀释8倍
波长=220nm： 0.594       0.558 0.536 0.717 0.608    0.596    0.619    0.621
波长=275nm： 0.001       0.002 0.004 0.008 0.004    0.006    0.002    0.004
试剂：
1. 碱性过硫酸钾溶液：40g K2S2O8+15NaOH →溶于无氨水中→稀释至 1000ml定容即可。溶液放在聚乙烯瓶内，可贮存一周。
2. 1+9盐酸
3.硝酸钾标准溶液：  （1）硝酸钾标贮备液：0.7218g以烘干4小时（105~110℃）硝酸钾溶于无氨水中，定容至1000ml，加入2ml三氯甲烷作为保护剂，可至少可稳定6个月。此溶液含硝酸盐氮100ug/ml。  （2）硝酸钾标准使用液：将贮备液稀释10倍即可。此溶液含硝酸盐氮10ug/ml。
实验步骤
标准曲线的绘制
1．分别吸取0、0.5、1.00、2.00、3.00、5.00、7.00、8.00ml的硝酸钾标准使用溶液于25ml比色管中，用无氨水稀释至10ml标线。
2．加入5ml碱性过硫酸钾溶液，塞紧磨口塞，用纱布及纱绳裹紧管塞，以防蹦出。
3．比色管置于压力蒸汽消毒器中，加热0.5h，放气使压力指针回零。然后升温至120~124℃开始计时。
4．自然冷却，开阀放气，移去外盖。取出比色管并冷却至室温。
5．加入1+9盐酸1ml，用无氨水稀释至25ml标线。
6．在紫外分光光度计上，以新鲜无氨水作参比，用10mm石英比色皿分别在220nm及275nm波长处测定吸光度。用校正的吸光度绘制标准曲线。
操作过程完全严格按照要求，试剂的配制也是在尽量精准的情况下完成的。
不清楚问题出在哪里？希望能有了解这一方面的能人帮忙解疑。非常感谢。

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