24小时热门版块排行榜    

查看: 5176  |  回复: 22

依然自然

新虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
9楼: Originally posted by mataomatao at 2015-05-13 20:25:25
能够证明提取的是RNA?如果做核磁采个P谱还差不多;仅仅是紫外,有DNA等或者降解的RNA,蛋白,色素等污染跑胶不正常;是可以理解的

实验室没有核磁采个P谱的条件,还是谢谢你哈!
生命就如旅行。。。。所以要一直笑着
11楼2015-05-14 09:47:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

blackapple3731

木虫 (小有名气)

引用回帖:
10楼: Originally posted by 依然自然 at 2015-05-14 09:46:05
1.提取的时候,直到最后一次的75%乙醇水洗都还能看到小块的乳白色的沉淀。
2.有在找有关CTAB提取的方法。
3.初提还不直到能稀释在跑胶、点样的,请问你说的稀释是冰上直接用DEPC水稀释,还是得加DEPC水再水浴溶解 ...

Marker 很亮 说明不是电泳槽的问题,点样的时候,混合一点loadingbuffer,可能是乙醇没晾干,RNA有点飘
其实我的专业是海洋化学
12楼2015-05-14 09:50:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

781055707

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
没提出来,总RNA离心以后是在管壁上的,洗时光洗底部是不够的,要整个管都洗到位。
采菊东篱下,悠然见南山。
13楼2015-05-14 11:42:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

luwei13566

木虫 (正式写手)

引用回帖:
10楼: Originally posted by 依然自然 at 2015-05-14 09:46:05
1.提取的时候,直到最后一次的75%乙醇水洗都还能看到小块的乳白色的沉淀。
2.有在找有关CTAB提取的方法。
3.初提还不直到能稀释在跑胶、点样的,请问你说的稀释是冰上直接用DEPC水稀释,还是得加DEPC水再水浴溶解 ...

就你点样用的那个RNA样品稀释,比如吸出来1ul,再加9ul的DEPC处理水或者是Rnase free water,就等于稀释了10倍。
这会仔细看了看你的图,发现其实你额胶中间还是有微弱的RNA带的,但重点是从点样孔拖尾,点样孔被堵的可能性很大~但也不排除RNA被讲解的可能。
大家相互帮助哈
14楼2015-05-14 20:34:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小蚂蚁虫

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
按照我们的说法就是没有提出来
15楼2015-05-14 22:18:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

peng1997

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
用TRIzol plant 或CTAB 或多糖多酚植物总RNA提取试剂盒
16楼2015-05-15 11:14:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ouyangxian

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
请问你电泳的时候电泳液是新配的吗?不确定你是不是跑胶的时候降解了
17楼2015-05-15 16:38:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

genebiotech

捐助贵宾 (初入文坛)


商家已经主动声明此回帖可能含有宣传内容
蛋白污染严重,或者重新配电泳液再试一下
18楼2015-05-19 01:52:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jinghun2004

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

目测基因组和多糖比较多,第二张图中能隐约看到RNA18S条带;关于稀释:如提取的RNA较纯,电泳上100ng就足够能看到条带,但是就你的电泳图来看,RNA含量很低。
19楼2015-05-19 10:34:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

holyala

木虫 (著名写手)

砖家

【答案】应助回帖

引用回帖:
9楼: Originally posted by mataomatao at 2015-05-13 20:25:25
能够证明提取的是RNA?如果做核磁采个P谱还差不多;仅仅是紫外,有DNA等或者降解的RNA,蛋白,色素等污染跑胶不正常;是可以理解的

要是提个RNA都得做MRI,那做分子生物实验的同学们都要跪了。紫外分光光度计,电泳,RT-PCR个个都能证明提出来的是不是RNA。

楼主电泳没跑好啊,第一个图Marker都没跑开就不说了,第二个图Marker用的是啥?普通琼脂糖胶跑RNA,最好用DL2000 DNA Marker,胶用0.8~1.2%,28S rRNA跑的位置和2000bp差不多。

前面有人答说上样量太大,建议稀释,我觉得很有道理。4.5ug/uL啊,这浓度!一般用个300-400ng跑电泳就能看得比较清楚了。

另外就是试试CTAB法,或者买个植物总RNA提取试剂盒。
20楼2015-05-19 10:41:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 依然自然 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 没有任何消息-是不是就凉了 +6 图啦图啦 2026-08-24 6/300 2026-08-24 17:44 by 小小红帆
[基金申请] 如果此刻你正在为国基感到焦虑,不妨来听听这首《基金之外》 +5 scalable 2026-08-24 5/250 2026-08-24 17:03 by spiderzhuzhi
[基金申请] 2026国自然函评费到账 +17 羊腰板 2026-08-21 19/950 2026-08-24 16:52 by iaeyuan
[基金申请] 建议基金发布提前给出明确的时间点 +13 kulium 2026-08-21 16/800 2026-08-24 16:27 by superceng
[基金申请] 估计是周四 +4 archvillain 2026-08-18 4/200 2026-08-24 13:53 by zzuzxg
[基金申请] 我面上完蛋了 +8 且听虎啸 2026-08-20 9/450 2026-08-24 13:52 by zzuzxg
[基金申请] 范进中举一文的中心思想 +6 炎黄贵胄 2026-08-22 7/350 2026-08-24 11:58 by 6543yes
[基金申请] 明天应该可查了!? +4 chengyan1220 2026-08-23 4/200 2026-08-24 08:47 by gloomy6159
[基金申请] 什么时候开奖? +10 CrisMessi 2026-08-18 11/550 2026-08-24 06:50 by 开心的小狮子
[基金申请] 2026年的国家社科基金项目通讯评审的新规则与新动向、新挑战 +4 process2012 2026-08-23 5/250 2026-08-23 19:58 by jurkat.1640
[教师之家] 跳槽后在研项目怎么办? +5 简单化xn 2026-08-22 10/500 2026-08-23 12:38 by 简单化xn
[基金申请] 今天放榜吗? +15 布布和一二 2026-08-19 16/800 2026-08-23 09:55 by 张春生
[基金申请] filecode,4个jtjc了 +13 ziyangfang 2026-08-19 16/800 2026-08-22 17:08 by WH3796
[基金申请] 今天基金会出结果吗?20260819 +16 kkkl_v 2026-08-19 17/850 2026-08-22 16:12 by 阿布Abu
[基金申请] 时间戳今天,20号变了 +5 archvillain 2026-08-20 5/250 2026-08-22 06:12 by hui_daxiao
[基金申请] 看来今天不会放榜了? +8 chengyan1220 2026-08-21 11/550 2026-08-21 17:52 by dcqxinyang
[基金申请] 时间戳又变了 +13 wuchongjun 2026-08-20 19/950 2026-08-21 17:21 by 紫杉醇
[论文投稿] 投稿咨询 +5 wwm09 2026-08-17 7/350 2026-08-21 10:11 by 期刊论文帮手
[基金申请] 重要消息,中午系统在维护 +11 yuleib84 2026-08-18 12/600 2026-08-20 11:09 by xskun
[基金申请] 明天放榜? +5 Shxjjxjkx 2026-08-18 5/250 2026-08-18 18:14 by -大大大大大-
信息提示
请填处理意见