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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 新手测序遇到问题，向各位虫子求助
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liuli124125

铜虫 (初入文坛)

[交流] 新手测序遇到问题，向各位虫子求助

我在所测得的序列中怎么也找不到下游引物序列，是测序的问题吗还是我的PCR过程出了问题呀。我用的是菌液去测序的，引物是简并引物。问题到底在哪里，我应该怎么去解决呀。向高手们求助了，谢谢。
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1楼 2008-07-13 00:39:39
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liuli124125

铜虫 (初入文坛)
★
reasonspare(金币+1,VIP+0):thx
我用的是TAKARA的pMD-19 T载体，菌也是新鲜的。反向互补也找过了，还是没有，在此谢过各位给我提供的非常好的建议。祝你们实验顺利了。
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9楼2008-07-15 00:18:21
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superarm

金虫 (正式写手)
★ ★ ★
reasonspare(金币+3,VIP+0):谢谢分享，欢迎常来
凭我的经验有两种可能
1.你的结果的假阳性，是单引物，就是上游引物扩增的结果
2.DNA片断一部分缺失
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与分子生物学的同仁一起遨游科学的海洋！
2楼2008-07-13 00:52:30
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xujian568

至尊木虫 (著名写手)

Count XU
★ ★
reasonspare(金币+2,VIP+0):积极交流奖
测序的问题可能性比较大，换个公司测，或是重测。
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活着就要让人感受到你的存在。
3楼2008-07-13 10:09:57
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香菱儿

铁杆木虫 (著名写手)
★ ★
reasonspare(金币+2,VIP+0):谢谢分享，欢迎常来
你是单向测的还是双向测的？如果是单向，也可能是你的插入片段比较长没测通吧？
赞一下(10人) 回复此楼
漫洒英雄泪，相离处士家。谢慈悲剃度在莲台下。没缘法转眼分离乍。赤条条来去无牵挂。那里讨烟蓑雨笠卷单行？一任俺芒鞋破钵随缘化！
4楼2008-07-13 10:37:41
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