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liuli124125

铜虫 (初入文坛)

[交流] 新手测序遇到问题,向各位虫子求助

我在所测得的序列中怎么也找不到下游引物序列,是测序的问题吗还是我的PCR过程出了问题呀。我用的是菌液去测序的,引物是简并引物。问题到底在哪里,我应该怎么去解决呀。向高手们求助了,谢谢。
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liuli124125

铜虫 (初入文坛)

我测的是两个反应,测得的大小也与预期差不多。 那我只有重新做过去测了哦,如果我不做TA克隆直接用PCR产物去测,提供简并引物给他,可行不呀?
5楼2008-07-13 23:14:58
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superarm

金虫 (正式写手)

★ ★ ★
reasonspare(金币+3,VIP+0):谢谢分享,欢迎常来
凭我的经验有两种可能
1.你的结果的假阳性,是单引物,就是上游引物扩增的结果
2.DNA片断一部分缺失
与分子生物学的同仁一起遨游科学的海洋!
2楼2008-07-13 00:52:30
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xujian568

至尊木虫 (著名写手)

Count XU

★ ★
reasonspare(金币+2,VIP+0):积极交流奖
测序的问题可能性比较大,换个公司测,或是重测。
活着就要让人感受到你的存在。
3楼2008-07-13 10:09:57
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香菱儿

铁杆木虫 (著名写手)

★ ★
reasonspare(金币+2,VIP+0):谢谢分享,欢迎常来
你是单向测的还是双向测的?如果是单向,也可能是你的插入片段比较长没测通吧?
漫洒英雄泪,相离处士家。谢慈悲剃度在莲台下。没缘法转眼分离乍。赤条条来去无牵挂。那里讨烟蓑雨笠卷单行?一任俺芒鞋破钵随缘化!
4楼2008-07-13 10:37:41
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