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KEVIN_LOVE

木虫 (正式写手)

[求助] 细胞单克隆筛选---愁死我了 已有2人参与

小弟现在正在筛细胞单克隆,用的是吉玛公司合成的pGPU6/GFP/Neo干扰载体,筛了7天之后克隆已经长出来了,而且荧光比较亮,克隆状态也挺好。但是过了几天,克隆的绿色荧光就逐渐减弱,今天看的时候基本上没有荧光了,这是为什么!?我都奔溃了。
还有我同时筛的DOX诱导过表达载体,双载体的单克隆实在是难筛。我都筛了两个月了,还没有出阳性克隆,请问各位有什么好的方法能够提高双载体筛选效率。
以上两个问题,如果能给出一些建议,感激不尽~!
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siriusxuan

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
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KEVIN_LOVE: 金币+5, ★★★很有帮助 2015-05-09 21:20:14
荧光过一段时间就会消失,老板曾经讲过是因为设计的时候选用了双顺反子什么的,不过没有关系,只要两端存在UTR序列,就能够稳定整合进基因组。
此座可言轻社稷,江山万里起风尘。
8楼2015-05-08 18:20:23
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