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医无止境

木虫 (正式写手)

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[求助] 米糠多糖的提取得率已有2人参与

看到文献上使用不同提取方法得到的米糠多糖得率都达到2%左右。我最近在做米糠多糖的提取，分别使用超声和高温高压两种方法，使用单因素试验对超声考察超声温度、时间、功率和料液比，对高温高压提取考察温度、料液比和时间，得到的得率都好低，最高只有4%左右。为什么别人读那么容易得到较高的得率，我做起来就那么低？
我的提取方法是：脱脂米糠5g，按照料液比加水在提取条件下提取，提取液离心，调PH6，加1% α-淀粉酶，60度水浴2h，调PH4，加1%糖化酶，50度水浴2h，加1ml的20U胃蛋白酶，37度水浴1h，调PH7，离心，过滤，上清加400ml 95%的乙醇，4度静置24h，离心，取沉淀通风厨挥干，称重，得粗多糖。称取粗多糖10mg，使用重蒸水定容到50ml，吸取2ml加到试管，加1ml5%苯酚和5ml浓硫酸，反应30min，490nm测定吸光度。标准葡萄糖的标准曲线按照NY/T 1676-2008制作。最后计算出粗多糖的纯度只有6~9%，多糖的得率最高只有4%左右，不知道哪一步有问题，请高手指点一二。

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