24小时热门版块排行榜    

查看: 508  |  回复: 3
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

蓝色的心情79

新虫 (初入文坛)

[求助] PCR 已有2人参与

最近做PCR,P尖镰孢菌的第二轮用来做DGGE,几天前同样的条件下P出来的效果还挺好,最近一阶段P出来的效果不好了,主条带几乎看不清,但是杂带特别亮。其中排除了引物的原因,因为以前也是用的同样的引物,1轮产物没问题,MIX也没问题,退火温度也降了,但是都不好使,求大神帮忙
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

蓝色的心情79

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by wangranjun at 2015-05-04 18:14:06
模板有没有问题呢?

一共P2轮,第1轮产物没有问题,稀释10倍后P第二轮,以前P的还挺好,现在P的看不见主条带,杂带导师挺亮
3楼2015-05-05 11:43:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 4 个回答

wangranjun

荣誉版主 (知名作家)

广庭之惘然

优秀版主

【答案】应助回帖

模板有没有问题呢?
他日扬翼九万里,历大千世界,定我红尘心!
2楼2015-05-04 18:14:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

18761615793

木虫 (正式写手)

小虫

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
蓝色的心情79: 金币+30, ★★★很有帮助 2015-05-10 15:55:25
引用回帖:
3楼: Originally posted by 蓝色的心情79 at 2015-05-05 11:43:43
一共P2轮,第1轮产物没有问题,稀释10倍后P第二轮,以前P的还挺好,现在P的看不见主条带,杂带导师挺亮...

二次PCR扩增要比一次复杂,对一次产物要鉴定再进行二次P,还有就是模板要稀释1000倍,注意二次PCR模板的纯度,且产物再次PCR极易产生错配,所以酶的特异性要高 最好选用热启动酶,或热启动型的高保真酶系列,能够最大避免非特异性产物产生
todayisdifficult,tomorrowismoredifficult,butthedayaftertomorrowisbeautiful
4楼2015-05-06 10:44:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
[基金申请] FileCode能看出啥? +4 要乐观耀哥 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:02 by 天神眷顾
[基金申请] 应该是93bebmhtak前后十一个字符比较关键 +14 Lanmanbaby 2026-08-09 22/1100 2026-08-10 14:57 by wwncly
[基金申请] 好奇怪的filecode +4 布布和一二 2026-08-08 5/250 2026-08-10 14:20 by 冰心玉壶晴
[基金申请] 综述论文作为代表作会不会影响评审专家的印象分? +10 yufeiwaner 2026-08-09 10/500 2026-08-10 13:44 by cdutwml
[基金申请] 关于代码变化问题,想知道的进来 +16 且听虎啸 2026-08-07 23/1150 2026-08-10 12:35 by majunge000
[基金申请] 2026国自然放榜时间 +9 布布和一二 2026-08-08 9/450 2026-08-10 11:22 by xxxx2020
[基金申请] filecode与中标关系的预测 +5 布布和一二 2026-08-07 5/250 2026-08-09 16:15 by 袁向阳007
[基金申请] 关于豆爷回答的JTJC与%2F数量 +5 yang182083 2026-08-06 7/350 2026-08-08 18:29 by zhanghaozhu
[基金申请] 国基金的申报应该改成非等额制,评价高的钱多评价低的钱少,但是增加资助率 +7 a089 2026-08-07 7/350 2026-08-08 18:05 by gltch
[基金申请] 关于filecode +4 布布和一二 2026-08-07 7/350 2026-08-07 22:55 by zhanghaozhu
[基金申请] 化学口download_prp&fileCode的固定段好像这几天一直没变,有变的大神么? +3 Tide man 2026-08-07 4/200 2026-08-07 22:39 by Tide man
[基金申请] 听说今天filecode变了 +24 布布和一二 2026-08-06 47/2350 2026-08-07 16:02 by zhiyanjiang
[基金申请] filecode变化情况 +6 布布和一二 2026-08-07 22/1100 2026-08-07 14:45 by 且听虎啸
[基金申请] filecode +14 等待解的谜 2026-08-06 19/950 2026-08-07 12:20 by wlwhappy
[基金申请] filecode +8 布布和一二 2026-08-06 11/550 2026-08-06 20:41 by tangpu318
[基金申请] 求各位大神看下 100+6 hpkpkpkp 2026-08-05 33/1650 2026-08-06 14:49 by zhiyanjiang
[基金申请] 好消息?这个有何含义??? +8 Tide man 2026-08-05 10/500 2026-08-05 16:14 by xmuxiaoyu
[基金申请] 有没有H口的?有收到消息的吗? +3 超级海虾 2026-08-04 3/150 2026-08-04 17:26 by 学教育滴
[基金申请] 纯娱乐,不喜欢勿喷 +7 Tide man 2026-08-04 10/500 2026-08-04 15:10 by loufangrui
信息提示
请填处理意见