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花开ヽ终是落

银虫 (小有名气)

[求助] WB相关实验,分子量12KD怎么作出漂亮的带,第一次做。求助 已有3人参与

导师要求做WB但是分子量着实太小,实验室都木有做过。求助分子量12KD,分离胶及浓缩胶浓度,电泳时间及转膜时间,感谢大神赐教
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花开ヽ终是落

银虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by nemo88 at 2015-04-27 16:22:44
12~15%胶  时间根据溴酚蓝或者Transgene有12k的预染marker    电压一般不是很讲究   我一般用100V15min转150V 跑个1个多小时。。。
0.22umPVDF膜 恒压 100V 45min

3Q

[ 发自小木虫客户端 ]
5楼2015-04-28 08:23:18
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WHABnew

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2015-04-28 09:21:00
当时实验室也有一个是15kd的,跟我用的同样浓度的胶,12%,电泳你可以看buffer,还有根据你的marker条带,太小的蛋白不注意的确容易跑出去,至于转膜可以用PVDF,但是得是22mm孔径的,45的太大,时间根据你门实验室仪器平时多少时间你就多少时间,先摸索下,然后做个考染基本就可以确定范围了

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

2楼2015-04-27 14:48:09
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swlsangon

木虫 (小有名气)

快乐的木虫

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
上层胶10%,下层胶12%
生命在于运动
3楼2015-04-27 15:44:48
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nemo88

禁虫 (小有名气)

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
花开ヽ终是落: 金币+5, ★★★★★最佳答案 2015-04-28 08:24:12
本帖内容被屏蔽

4楼2015-04-27 16:22:44
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